原文由 cxbaoa 发表:
菜鸟求助液相色谱测定药物浓度的方法问题,谢谢大家
以前没接触过高效液相色谱,前不久做试验(抗癌药物异环磷酰胺在无机吸附剂上的吸附)需要测药物随时间在溶液中浓度变化,以前课题组都用紫外,做出标准曲线即可,但是我的药物存在紫外末端吸收,因此数据老是不对头忽大忽小,因此考虑用高效液相色谱测浓度。也有此药的文献,但都是医学方面测其在血清中浓度,但我的实验目的很简单,就是测这个药(原料药)在水溶液中的浓度(没有其他的东西),那么我该怎么做呢?(那也不存在对照品供试品等称呼了吧)我自己想的是,可不可以将系列浓度溶液进样先做出浓度-面积工作曲线,然后将需要测的样进样之后,根据峰面积带入标准曲线求即可?
现在试验刚刚开始做,发现的问题是
1在主峰前面有两个小峰,同学说是因为我的溶剂是水,与流动相(乙腈水)不同产生的噪音,这样解释合理吗?
2保留时间在乙腈:水=35:65时为四分钟左右,是不是可以调整流动相比例使出峰时间在五六分钟,这样结果会更准确?
3药物浓度在10-5000mg/l都可以测到,做标准曲线的话应该取在哪个范围?
低于10mg/l怎么只有前面的那两个峰了,主峰就不见了(文献中提到最低检测限0.5mg/l呢),为什么我的灵敏度就不行了呢?(仪器型号岛津LC-10AVP,紫外检测器SPD-10AVP,柱型号ALIGENT-ECLIPSE XDB-C18)
4外标法(标准曲线法
)大家认为准确度可以吧?
原文由 cxbaoa 发表:
菜鸟求助液相色谱测定药物浓度的方法问题,谢谢大家
以前没接触过高效液相色谱,前不久做试验(抗癌药物异环磷酰胺在无机吸附剂上的吸附)需要测药物随时间在溶液中浓度变化,以前课题组都用紫外,做出标准曲线即可,但是我的药物存在紫外末端吸收,因此数据老是不对头忽大忽小,因此考虑用高效液相色谱测浓度。也有此药的文献,但都是医学方面测其在血清中浓度,但我的实验目的很简单,就是测这个药(原料药)在水溶液中的浓度(没有其他的东西),那么我该怎么做呢?(那也不存在对照品供试品等称呼了吧)我自己想的是,可不可以将系列浓度溶液进样先做出浓度-面积工作曲线,然后将需要测的样进样之后,根据峰面积带入标准曲线求即可?
现在试验刚刚开始做,发现的问题是
1在主峰前面有两个小峰,同学说是因为我的溶剂是水,与流动相(乙腈水)不同产生的噪音,这样解释合理吗?
2保留时间在乙腈:水=35:65时为四分钟左右,是不是可以调整流动相比例使出峰时间在五六分钟,这样结果会更准确?
3药物浓度在10-5000mg/l都可以测到,做标准曲线的话应该取在哪个范围?
低于10mg/l怎么只有前面的那两个峰了,主峰就不见了(文献中提到最低检测限0.5mg/l呢),为什么我的灵敏度就不行了呢?(仪器型号岛津LC-10AVP,紫外检测器SPD-10AVP,柱型号ALIGENT-ECLIPSE XDB-C18)
4外标法(标准曲线法)大家认为准确度可以吧?