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原文由 goog001 发表:
我们用的是安捷伦1100的高效液相色谱仪，在做一个软膏剂的时候，标准规定的浓度进样10μl，峰形有前延峰，把浓度稀释一半，进样10μl，峰的对称性在1.0左右，如果再把浓度稀释一半，进样20μl的话，峰形又不对称了。
大家分析一下是什么原因？
液相色谱的进样量与峰形之间的关系怎样？
（药品名字是“复方地塞米松乳膏”，内标法测定地塞米松含量，内标物是甲睾酮）
原文由 hujijimn 发表:原文由 goog001 发表:
我们用的是安捷伦1100的高效液相色谱仪，在做一个软膏剂的时候，标准规定的浓度进样10μl，峰形有前延峰，把浓度稀释一半，进样10μl，峰的对称性在1.0左右，如果再把浓度稀释一半，进样20μl的话，峰形又不对称了。
大家分析一下是什么原因？
液相色谱的进样量与峰形之间的关系怎样？
（药品名字是“复方地塞米松乳膏”，内标法测定地塞米松含量，内标物是甲睾酮）
1. 进10ul不对称后稀释一半进10uL对称；—— 应该是柱子过载；
2. 后又稀释一倍进20uL，不对称 ——样品体积大，使得样品不能浓缩于柱头，不便于分离导致，可以更换稀释剂，例如说减少乙腈/甲醇的量，增加水的量试一试。
原文由 goog001 发表:原文由 hujijimn 发表:原文由 goog001 发表:
我们用的是安捷伦1100的高效液相色谱仪，在做一个软膏剂的时候，标准规定的浓度进样10μl，峰形有前延峰，把浓度稀释一半，进样10μl，峰的对称性在1.0左右，如果再把浓度稀释一半，进样20μl的话，峰形又不对称了。
大家分析一下是什么原因？
液相色谱的进样量与峰形之间的关系怎样？
（药品名字是“复方地塞米松乳膏”，内标法测定地塞米松含量，内标物是甲睾酮）
1. 进10ul不对称后稀释一半进10uL对称；—— 应该是柱子过载；
2. 后又稀释一倍进20uL，不对称 ——样品体积大，使得样品不能浓缩于柱头，不便于分离导致，可以更换稀释剂，例如说减少乙腈/甲醇的量，增加水的量试一试。
谢谢指教！
还有一个问题请教大家，标准规定的色谱条件，但是在实际试验过程中，峰形、理论板数等参数并不好。问那些参数是允许变动的？(如流动相、进样量、流速、柱温等)
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