主题：【转帖】残留农药的气相色谱分析

2.    实验条件
1.菊酯:[1]
1.1主要试剂:丙酮(色谱级),乙腈(农残级),正已烷(农残级),无水硫酸钠(优级纯)。
1.2气相色谱检测条件:气化室温度220℃,ECD检测器温度300℃.程序升温:200℃,保留1min;以30℃/ min升至230℃,保留20 min;再以20℃/ min升至270℃,保留5ｍmin.
1.3 样品处理与净化:
1.3.1样品处理:将蔬菜样品切块置于食品粉碎机中粉碎.准确称取25.00g样品倒入高速组织捣碎机中,加入50.00ml乙腈,高速匀浆3 min.倒入100ml装有5-7ｇ氯化钠的具塞量筒,过滤,收集滤液,盖上盖子,震荡0.5-1 min,在常温下静置10-15 min,等乙腈相和水相分层.
1.3.2样品净化:准确吸取10.0 ml有机相溶液放入100ml烧杯中,在氮吹仪上浓缩近干(水浴锅加热至80℃),加入2ml正已烷.将Florisil固相萃取小柱用5ml10%丙酮—正已烷烷基化,将烧杯中已溶解的样品加到已条件化的Florisil小柱上,并用15ml离心管接收洗脱液,再用5ml10%丙酮-正已烷洗烧杯2次,也加到小柱上洗脱,将收集的洗脱液放在氮吹仪上浓缩至5ml以下(水浴温度55℃),再经无水硫酸钠层析柱洗脱(用10ml10%的丙酮—正已烷淋洗层析柱),正已烷定溶至5.0ml,用GC-ECD分析.
2.有机氯和有机磷:[2]
2.1试剂与色谱条件:有机氯采用ECD检测器,色谱柱为0.3%OV—17,2.7%OV—210/chromosorbWHP柱; 进样口及检测器温度为240℃;柱温为190℃;氮气流速为50 ml/min;采用外标法,以峰高进行定量分析。试剂:丙酮,石油醚(30-60℃),硫酸,无水硫酸钠,二氯甲烷,活性碳. 有机磷采用FPD检测器,色谱柱为5%SE-30/chromosorbWAW柱;进样口及检测器温度为240℃;柱温为200℃;氮气流速为50ml/min;氢气流速为50ml/min;空气流速为50ml/min;进样量为2ul;混标浓度:敌敌畏、甲胺磷、乐果、对硫磷、马拉硫磷均为10ug/ ml。采用外标法,以峰高进行定量分析.
2.2样品前处理.所有样品均直接从菜场取得,取得后不经清洗,直接捣碎后进行前处理.有机氯测定前处理.取捣碎样品5g,以丙酮浸泡提取,再经石油醚萃取后,以硫酸磺化至无色,用无水硫酸钠溶液洗涤后,经无水硫酸钠过滤,定容至10ml.有机磷测定前处理.取捣碎样5g与50g无水硫酸钠、0.3-0.5g活性碳混合振摇后,以二氯甲烷提取,提取液经过滤、挥干后,定容至10ml。所有有机氯、有机磷处理液均呈无色、透明状。

3.有机磷: [3]
3.1仪器和主要化学试剂:配FPD检测器,磷滤光片(525cm).SPME手柄配85um聚丙烯酸酯纤维头.五种有机磷农药由国家标准物质中心提供,敌百虫浓度为2.0mg/ml，敌敌畏浓度为1.0mg/ml,乐果浓度为1.1mg/ml，甲基对硫磷浓度为1.04mg/ml,对硫磷浓度为1.0mg/ml.
3.2色谱条件:毛细管柱为CBP10-M25-025(岛津公司).柱温起始80℃,保持1min,然后以每分钟10℃的速度升至230℃,保持9min,分流进样,分流比为25:1,载气用氮气,流速为2.4ml/min.氢气流速60 ml/min.空气流速60 ml/min.气化室温度250℃.检测器温度300℃.固相微萃取条件;用纯水配制试验所需浓度的五种有机磷农药混合标准日夜,取15 ml进行萃取试验.出峰顺序为敌百虫,敌敌畏,乐果,甲基对硫磷,对硫磷.
4.农药残留的色谱分析法: [4]
4.1仪器与试剂:GC17A-QP5000 GC-MS联用仪;CLASS-5000工作站;DB-1弹性石英毛细柱(30m×0.25mm×0.25μm),超声波发生器.正己烷,乙酸乙酯, 弗罗里硅土,无水硫酸钠.
4.2.色谱条件:载气为高纯氦气,柱前压80KPa,柱流速1.2 mL/min,不分流进样方式.进口温度:230℃,传输线温度:250℃.柱温程序:初始温度80℃,保持1min,以10℃/min的速率升温至250℃,保持7min.离子源EI,温度250℃;检测器电压为1.2kV;全扫描质量范围:40-400amu;选择离子扫描时以特征离子质量数组成离子组;质谱联用仪经全氟三丁胺(PFTBA)自动调谐,灵敏度和分辨率达到最佳匹配.
4.3.1样品提取和净化:取约100g置于组织捣碎机中打碎匀浆,准确称取50g匀浆液,加入100 ml正己烷,超声提取15imn,过滤,留滤液,再向滤渣中加入50 ml正己烷，二次提取,合并滤液并经无水硫酸钠干燥后,再经旋转蒸发仪浓缩至3 ml,待净化.样品净化:样品经层析柱净化.层析柱上下两端各加2cm厚的无水硫酸钠,中间填充约10g弗罗里硅土,用30ml正己烷预淋洗,再将浓缩提取液转移至柱中,用正己烷/乙酸乙酯(95/5,V/V)淋洗,收集25 ml淋出液,浓缩后定容至1 ml,待测.
    在检测农药残留上,摘录毛细柱产品如下:
表1:农药检测毛细柱(康林2003-2004产品目录)
柱名    对照品牌    类似固定相    使用温度    应用范围
SPB-1非极性柱    HP-1,DB-1,BP-1    SE-30,OV-1,    -60-320℃    农药
SPB-5弱极性柱    HP-5,DB-5,BP-5    SE-54,SE-52,
OV-73    -60-320℃    农药   
E-5,PTE-5QTM
弱极性柱        SE-54    -60-320℃    多氯联苯,有机磷,有机氯
SPB-1701中极性柱        OV-1701    室温-280℃    有机磷,有机氯农药
SPB-608型柱    HP-608,DB608        室温-300℃    多氯联苯,有机磷,有机氯
,除草剂,拟除虫菊酯
注释:DB-1柱(固定相:100%聚甲基硅氧烷)相当于OV-101
DB-5柱(固定相:5%苯基95%聚甲基硅氧烷)相当于SE-52
3.    结论   

在农药残留量的检测上,仅用气相色谱会有检测器不同的问题,因而比较麻烦.采用GC-MS联用仪可避免此种问题.而且,固相萃取技术在水果蔬菜等农产品的农药多残留分析中成功使用,使检测步骤大大简化,时间缩短,灵敏度准确度提高.利用固相萃取-双柱双检测器气相色谱同时进行25种有机氯农药的定性定量,有广泛的应用前景.