主题：【资料】检测“瘦肉精”的仪器与方法

安捷伦科技：sampliq scx固相萃取柱和液相色谱/串联质谱联用

  岛津推出最新瘦肉精检测方案

  个人们又熟悉又厌恶的“瘦肉精”又幽灵般地现身，我们忧心忡忡，食品安全如何保证？先进的检测技术就是保证食品安全的重要手段之一。近期，岛津推出联用超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8030测定猪肉中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的方法。

    瘦肉精是一类动物用药，将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。在中国，通常所说的“瘦肉精”则是指克伦特罗，它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-受体激动剂的药物，例如莱克多巴胺和沙丁胺醇等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。我国也已经于2002年明确将其列入《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药品物种目录》。对于瘦肉精的检测，我国的SNT 1924－2007方法标准中规定的定量限一律是0.5 μg/kg。日本肯定列表中克伦特罗限量标准较严格，为0.05 μg/kg，因此对于出口到日本的产品中克伦特罗的检测要求更高。

    使用岛津超高效液相色谱串联质谱联用法检测猪肉中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的方法，首先，在样品经提取后，用超高效液相色谱LC-30A快速分离，三重四极杆质谱仪LCMS-8030进行定量分析。本方法分析速度快，精密度良好，线性范围宽(0.05～100 ng/mL)，校准曲线的相关系数在0.999以上。方法定量限满足国标0.5 μg/kg的要求，并且对于猪肉中克伦特罗的检测方法定量限可以达到0.05 μg/kg，检测灵敏度完全符合日本肯定列表的要求。

月旭公司为您提供瘦肉精检测解决方案

  盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂，20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率，但如果作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的时间长、代谢慢，所以在屠宰前到上市，在猪体内的残留量都很大。这个残留量通过食物进入人体，就使人体渐渐地中毒，积蓄中毒。如果一次摄入量过大，就会产生异常生理反应的中毒现象，因此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。

    自瘦肉精事件发生以来，月旭公司一直密切关注此事，迅速推出了动物组织中盐酸克伦特罗（瘦肉精）检测的全套解决方案。
    具体测定方法如下：

1. 适用范围
适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物的检测。

2. 提取
将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中，10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min，将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。
向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液，涡动1 min，然后再6000 rpm下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5 mol/L NaOH溶液调节pH至5.2，待净化。

3. 净化
活化/平衡：依次向Welchrom® P-SCX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、3 mL水和3 mL 30 mmol/L盐酸溶液，流出液弃去；
上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去；
淋洗：依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干；
洗脱：用2×2 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃下氮气吹干；

4. 检测
50% 甲醇溶解残渣，涡动振荡1 min,过0.22μm滤膜，装入进样小瓶，进样10μL分析。
色谱条件：
色谱柱： Ultimate XB-C18 液相色谱柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm）
流动相： 0.01 M磷酸缓冲液：甲醇=65:35
流速： 0.7 mL/min
进样量： 20 μL
柱温： 30 °C
检测波长： 244 nm
运行时间：11 min

5. 结果
回收率和重现性实验
将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。



猪肝脏中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱

本方法中使用到得耗材：
1． 固相萃取小柱 Welchrom P-SCX 60mg/3mL (P/N:WSP020306)
2． 色谱柱：Ultimate XB-18,50*2.1mm，3μm（P/N:Ult3B18205）
3． 13mm，孔径0.22μm尼龙针孔滤膜（P/N: WEL-SFNY213022）

先占楼观看，然后点评，O(∩_∩)O~
瘦肉精检测卡 我觉得事忽悠人的，根本就没有这个必要。
我记得前几天科协举办的一个讲座上食品专家说了，在一定程度上社会的恐慌是又一些无知的记者引起的，他们只知道制造爆炸性的新闻，而不顾后果。

科普报告地址http://tv.people.com.cn/GB/43911/14258227.html
食品安全在视频的最后部分

   

迪马科技为您提供“瘦肉精”检测应对方案

    克伦特罗是一种β-兴奋剂，添加到饲料中，可以增加猪肉的瘦肉率。克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。
    国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。盐酸克伦特罗属于非蛋白质激素，耐热，使用后会在猪体组织中形成残留，尤其是在猪的肝脏等内脏器官残留较高，食用后直接危害人体健康。其主要危害是：出现肌肉振颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等症状，特别是对高血压、心脏病、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，严重的可导致死亡。
    迪马科技早前刊发的《固相萃取技术与应用手册》（第二版）中58-59页（第三版60-61页）就曾记载着关于动物组织中盐酸克伦特罗等4中β-兴奋剂药物的测定，现截取其内容，提供给相关检测部门，希望可以对您的工作有所帮助。

检测费用高昂之至，恐怕普通消费者又无力维权了，难道要和乳品企业一样，要求肉制品企业配备一定的检测仪器，有一定的检测能力，出厂必检瘦肉精

博纳艾杰尔提供瘦肉精全套检测方案

  ——从现场快速筛查到实验室确证

    盐酸克伦特罗（Clenbuterol）俗称“瘦肉精”，属于β-兴奋剂，因为该药可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被一些畜牧养殖企业作为养殖促进剂非法使用。人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后，残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康造成极大危害。因此世界许多国家现已被明令禁止在饲料中添加克伦特罗来增加动物的瘦肉率。

    我国农业部规定盐酸克伦特罗在动物体内的残留标准为：马、牛肌肉0.1ug/kg、 肝、肾0.5ug/kg牛奶0.05ug/kg

1、  现场快速筛查产品

瘦肉精（盐酸克伦特罗）胶体金检测卡用于定性检测动物尿液（例如猪尿、牛尿、羊尿等）中盐酸克伦特罗残留，整个检测过程只需要5-10分钟左右，灵敏度为3ng/ml（3ppb）。快速方便，适用于屠宰场、农贸市场、超市等现场快速检测。

2、  快速检测产品

瘦肉精（盐酸克伦特罗）ELISA试剂盒使用酶联免疫检测试剂盒方法可检测尿，肌肉，肝脏及饲料中的盐酸克伦特罗。同时用于处理96个样品，操作时间短于45min，灵敏度为0.025-0.1ng/m(ppb)。具有经济、快速等优点。可进行定性半定量，相对于胶体金检测卡结果更准确，适用于实验室快速检测。

3、准确定性定量产品

采用SPE-GC/MS或SPE-LC/MS等手段可对动物组织、尿液、肝脏、饲料、动物加工制品等中的盐酸克伦特罗的进行准确定性定量，能提供确证数据报告。适用于实验室确证实验或出具法律依据报告。

*      固相萃取柱：Cleanert PCX 150mg/6mL（P/N：CX1506）

*      GC色谱柱：DA-5MS, 30m×0.25mm×0.25µm（P/N:1525-3002）

*    参考配置：12位SPE真空装置（P/N: VM12）

检测方法如下

1.实验材料1.1 固相萃取小柱：Cleanert PCX(150mg/6mL)P/N: CX15061.2 四种β-激动剂药物：盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗、莱克多巴胺等4种β-激动剂药物。2. 试料的制备  准确称取已绞碎的组织样品10g，于50mL具塞离心管中。加入20mmol/L的乙酸铵缓冲溶液20mL，均质5min。加入50uL β-盐酸葡萄糖醛甙酶溶液，摇匀、超声15min，于37℃酶解18h。于3000r/min离心5min，过滤上清液，收集滤液。3. 净化  依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L盐酸5mL润洗固相萃取小柱，将上述备用液过柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脱PCX小柱，收集洗脱液于具塞玻璃试管中，50℃下氮气吹干。在样液过柱和洗脱过程中流速控制在1mL/min左右。4. 衍生化及检测将上述盛有残渣的具塞玻璃试管放入50℃烘箱中加热片刻，除去水分后，加入甲苯100mL和双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）100mL，涡旋振荡20s，密封玻璃塞，置于80℃恒温烘箱中加热1小时，冷却后加入300mL甲苯，作为试样溶液，供气相色谱-质谱分析（色谱柱：DA-5MS, 30m×0.25mm×0.25µm，P/N:1525-3002）。5. 结果5.1 回收率实验（精密度和准确度）将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，配制1μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L和100μg/L五个浓度的试样溶液，每批次内同一浓度做5次平行实验，共4个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。猪肝中实验结果列表如下：



5.2重复性实验（批间误差实验）：

猪肝中实验结果列表如下：

赛智科技STI501液相色谱仪检测瘦肉精方案

  近期，国内双汇火腿肠出现食品安全问题所引发的“瘦肉精”事件令国人对食品安全颇为堪忧，赛智科技研发的高效液相色谱仪希望能对食品安全方面的检测提供帮助。

  据悉，瘦肉精是一类动物用药，有数种瘦肉精是一类动物用药，有数瘦肉精是一类动物用药，有数种药物瘦肉精是一类动物用药，有数种药物被称为瘦肉精，例如莱克多巴胺（Ractopamine）及克伦特罗（Clenbuterol）等。将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。猪食用后可大量吸收并大量沉积于肝、肺、肾中却不会中毒，而且还促进猪的骨骼肌(瘦肉)蛋白质合成和减少脂肪沉积。但是人体摄入较多“瘦肉精”后，会出现头晕、恶心、手脚颤抖、心跳，甚至心脏骤停致昏迷死亡。

  据赛智科技技术部工程师介绍， 目前，检测瘦肉精的方法主要有四种，即高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱法[/url]（HPLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]一质谱法（GC－MS）、毛细管区带电泳法（CE）和免疫分析技术（IA）。而我国结合自己的实际情况，2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种：即高效液相色谱法（HPLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]一质谱法（GC－MS）。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法，其最低检测限为 0．05μg/kg，优点是检测精确度高，而且假阳性率低；缺点是检测过程烦琐、检测时间长，需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC－MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低，已将GC－MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC－MS法的缺点同HPLC相似。目前，最简单的检测方法是用试剂条检测猪尿，现场十几分钟出结果，成本约为20元，但是该方法只能针对活猪。
而要从猪肉中检测“瘦肉精”则要依赖高效液相色谱(HPLC)或[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp]气质联用([/url]GC-MS)等方法，在肝、肉、组织和饲料等样品中对残留物开展检测，需要24小时才能从实验室里出结果。

赛智科技仪器向广大用户推介使用STI501系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱仪[/url](HPLC)检测肉制品中瘦肉精！
(1)试剂和材料
①盐酸克伦特罗标准品
②乙醚；分析纯
③正己烷：分析纯
④甲醇：色谱纯
⑤盐酸克伦特罗标准液
⑥lmol／I。盐酸溶液
⑦0．05mol／L乙酸缓冲液
⑧0．3mol／L乙酸缓冲液
⑨lmol／LNaOH溶液 ’
⑩甲醇液：甲醇—重蒸水(75+25)
(2)仪器和设备
①高效液相色谱仪
②匀浆机
③旋转蒸发仪
④电子天平：0.01mg
⑤紫外分光光度计
⑥离心机
⑦固相萃取仪 HGC-8
⑧固相小柱
(3)测定步骤
①提取和净化 取组织样品10g，加入30ml lmol／L盐酸溶液匀浆，超声波振荡3h，5000r／mln的速度离心10min，—上清液用lmo]／LNaOH溶液滴至碱性，乙醚或正已烷抽三3次，抽提液在水浴锅上蒸发至5ml后上Silioa小柱，以除去大部分杂质，洗脱液上Alu—mina A小柱，将待测成分吸附在小柱上，用0．05mol几乙酸缓冲液(pH7．0)洗涤小柱3次，o．3mol／L乙酸缓冲液洗脱待测成分，冷冻干燥，用0．5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。
②测定
a．色谱条件
液相色谱仪：VERTEX STI5000
色谱柱：C18柱，250mmX4.6mm
流动相：甲醇—水(75+25)
流速：0．65ml／mill
检测波长：243nm
进样量：100uL
b．色谱测定 分析样品按上述仪器操作条件供高效液相色谱仪分析。
③空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。
(4)检测限和回收率
本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0．001ug/g’回收率范围为80％±20％
据报道，市民在现实生活中可以通过以下方法辨别猪肉是否有“瘦肉精”嫌疑：
对肉要“察其色，观其形”。“瘦肉精”肉，脂肪层薄，颜色特别鲜红，瘦肉纤维疏松，时有少量“汗水”渗出肉面；而正常猪肉，脂肪洁白，肉色较浅，外表微干，有弹性，不会有“出汗”现象；
因为动物摄入的外来毒素、药物及其代谢产物，大多在肝脏富集解毒，建议不吃或少吃肝脏。

复杂的方法适合于实验室做研究用，只有非常方便的检测方法才适合普通老百姓

方法不难，但却没人去认真的做啊