主题:【已应助】T3 柱能不能走磷酸盐

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Ins_83adee8c
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各位老师们好,我最近合成了一个检测酶活的探针,想用质谱检测探针底物。因为检测酶活性需要把探针与酶在磷酸盐缓冲液中共孵育,但是剪切下来的探针极性比较大,前处理液液萃取回收率太低,想直接蛋白沉淀做。

想请问一下各位老师可不可以用以下的方法:通过调整色谱方法使探针剪切下来的结构在前 3.5 个柱体积不出峰(waters T3 柱,2.1*100 mm 1.8 μm),这部分溶液直接流动切进废液中不进质谱,然后设置质谱程序在待测物出峰前 0.5 分钟流动切换进质谱分析。

有几个小问题:我们实验室以前用 C18  柱这样做过,但是新用了 T3 柱,虽然磷酸盐是无机盐但还是会有点点怕在 T3 柱上不是死体积出峰,想请教一下各位老师有没有做过类似的实验,可不可以用 T3 柱这样做呢?走完磷酸盐要怎么保养柱子比较好呢?

谢谢各位老师。
推荐答案:hujiangtao回复于2023/02/28
T3柱子比C18极性强一些,样品中少量磷酸盐问题不大,前面的已经进废液了
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hujiangtao
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T3柱子比C18极性强一些,样品中少量磷酸盐问题不大,前面的已经进废液了
xiaolanzi5
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只要不是流动相有磷酸盐就没事。用完后和c18柱处理一样。
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原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
T3柱子比C18极性强一些,样品中少量磷酸盐问题不大,前面的已经进废液了
谢谢老师
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原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:
只要不是流动相有磷酸盐就没事。用完后和c18柱处理一样。
好呢,谢谢老师
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