主题:【讨论】乙腈的紫外吸收

浏览 |回复10 电梯直达
sdcuiyujie
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我做HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,设定波长是196nm。出现了好多问题,首先作了一下乙腈的吸收,发现吸收很大;另外一个是每次做的谱图都不一样,差别大;基线噪音大;有的峰特别宽。到底是怎么回事?
用的是紫外检测器。
请大家帮帮我啊。



辣椒王
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原文由 sdcuiyujie 发表:
我做HPLC用的是水和乙腈,比例是95:5,设定波长是196nm。出现了好多问题,首先作了一下乙腈的吸收,发现吸收很大;另外一个是每次做的谱图都不一样,差别大;基线噪音大;有的峰特别宽。到底是怎么回事?
用的是紫外检测器。
请大家帮帮我啊。






请教一下你测试乙腈紫外吸收的目的是什么?
紫外波长范围一般是说在190-400或者200-400,196nm本来就是属于高能紫外区了,在这个范围紫外吸收强干扰大是不可避免的。你想用这个波长来定量5%乙腈基本上是不可能的事情。
小余儿
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在这个波长下乙腈肯定是有吸收峰的,如果水不好也会产生吸收峰,流动相的质量很关键的,还有混合时的脱气也很关键,如果达不到要求建议改用其他检测器,如蒸发光,可能流动相的影响会小些。
sdcuiyujie
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因为我做高效液相色谱用的流动相是水和乙腈,如果乙腈有紫外吸收,是不是就干扰了样品的测定啊
sdcuiyujie
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我们学校的液相只有紫外检测器
比较郁闷
xysu
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原文由 sdcuiyujie 发表:
我们学校的液相只有紫外检测器
比较郁闷


乙腈在这个波长下会有一点吸收的,乙腈还有水里面的微量杂质在这么低的波长下也会出峰,总之,这么低的波长,基线要走平是很难很难的。
我倒试过一次在200nm下检测,在乙腈水条件下基线根本没法看,后把水改成磷酸盐buffer,搞定。不过我那个化合物在200下吸收很强,浓度也配得高,这样基线噪音大一点也无所谓啦。我们也不定量。
sdcuiyujie
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kanjianwei
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检测波长太低了。溶剂干扰太大。建议更换波长或者流动相。。。
另外不知道你用什么溶剂溶解样品,,最好选流动相。。
sdcuiyujie
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sdcuiyujie
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谢谢大家了
我决定不用紫外检测器了
想试试蒸发光散射检测器
有成果了,告诉大家
永恒的心
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是不是你用的乙腈不好,建议更换试一下