主题:【原创】正相色谱柱与反相色谱柱的区别

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正相色谱柱与反相色谱柱的区别

本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:

  1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

  2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
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色谱的正反相是根据固定相和流动相的相对极性比较而区分的。一般情况如下:

正相色谱:固定相极性大于流动相极性:常见的色谱柱有:硅胶色谱柱、氨基色谱柱、苯基色谱柱、氰基色谱柱等。

反相色谱:固定相极性小于流动相极性:常见的色谱柱有:C18色谱柱、C8色谱柱等。
qq250083771
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正相色谱用的固定相通常为硅胶,以及其他具有极性官能团,如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。
三人行
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原文由 qq250083771(qq250083771) 发表:
正相色谱用的固定相通常为硅胶,以及其他具有极性官能团,如胺基团和氰基团的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18、C8、C4、C6H5等。


内容和上面重复了。
三人行
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这不是正相色谱柱与反相色谱柱的区别,应改成正相色谱与反相色谱的区别。
三人行
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正相色谱所用试剂毒性较大,能用反相色谱检测的尽量不用正相色谱。
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原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
正相色谱所用试剂毒性较大,能用反相色谱检测的尽量不用正相色谱。
好的 知道了 谢谢 以后还要多多向您请教啊
三人行
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原文由 qq250083771(qq250083771) 发表:
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
正相色谱所用试剂毒性较大,能用反相色谱检测的尽量不用正相色谱。
好的 知道了 谢谢 以后还要多多向您请教啊


请教不敢当,共同学习。
hyf020115212
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谢谢各位大侠的叙述,我是初学者,受教了
透明
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原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
正相色谱所用试剂毒性较大,能用反相色谱检测的尽量不用正相色谱。

一台色谱,是不是既可以使用正相,也可以使用反相?
三人行
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原文由 透明(zsj201204) 发表:
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:
正相色谱所用试剂毒性较大,能用反相色谱检测的尽量不用正相色谱。

一台色谱,是不是既可以使用正相,也可以使用反相?


做好置换可以使用。