主题:【分享】有关流动相的一些知识——3月加2钻石币

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lijing320323
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液相色谱方法开发过程中,流动相的选择至关重要。
1.  流动相选择原则:
1)  针对待分离样品的极性,选择极性适中的两种或三种试剂;
2)  两相需互溶;
3)  对人体伤害小;
4)  截止波长低(防止覆盖样品峰)。
对于制备色谱,还需多加几条:
5)  流动相易挥发(容易除溶剂);
6)  粘度低(不易超压);
7)  不会损害色谱柱及泵(高比例甲醇会引起硅胶填料流失,高比例水相会使氨基键合硅胶填料水解,二氯甲烷会腐蚀泵等金属);
8)  不会使样品变质;
9) 对样品有较好的溶解性。
2. 正相常用色谱流动相组合:
正己烷-二氯甲烷;正己烷-乙酸乙酯;正己烷-乙醇;正己烷-异丙醇;二氯甲烷-乙酸乙酯;二氯甲烷-甲醇。
3. 反相常用色谱流动相组合:
水-乙腈;水-甲醇;甲醇-乙醇;甲醇-二氯甲烷;乙腈-二氯甲烷;
常规情况下,将流动相中加少量酸,调pH至3左右,以抑制固定相中残留硅羟基作用,改善峰型;有时分析生物碱类样品,需将流动相调为碱性(选用耐碱色谱柱)。
对于色谱方法开发工作者,应根据样品信息,灵活选择流动相。
4. 常用试剂极性大小
水>甲醇>乙腈>丙酮>乙醇>异丙醇>乙酸乙酯>四氢呋喃>二氯甲烷>正己烷。
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千层峰
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不会损害色谱柱及泵,,,,这点很难做到。。多少都有点损害的
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