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液相色谱（LC）
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主题：【求助】液相色谱柱

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Insm_e1a619b7
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发表于：2019/12/24 16:56:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求助各位！！！！！流动相是乙腈－磷酸缓冲盐（25-75），色谱条件没有问题，样品是血浆样品。刚开始用的时候色谱柱也没有问题，用了一段时间发现色谱峰较宽，柱效降低，这种情况柱子还有救吗。求助大佬们，还有没有什么处理方法。
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2019/12/24 17:16:54 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一个是缓冲盐没冲干净，第二个是样品脏。先用纯水或低浓度甲醇水冲，低流速，然后用甲醇冲
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xiaogumd11
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2019/12/24 17:49:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
多用纯甲醇冲洗一两个小时，再看看有没有改善
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hujiangtao
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2019/12/24 17:57:37 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品有点脏 可以考虑优化前处理
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Insm_e1a619b7
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2019/12/24 18:16:06 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaogumd11(v3247983) 发表:多用纯甲醇冲洗一两个小时，再看看有没有改善
好的，我试试
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Insm_e1a619b7
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2019/12/24 18:16:27 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 检测老菜鸟(v3295053) 发表:第一个是缓冲盐没冲干净，第二个是样品脏。先用纯水或低浓度甲醇水冲，低流速，然后用甲醇冲
好的，我试试
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淹死的鱼??
Insm_b8558831
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2019/12/25 10:32:52 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先采用楼上的方法处理。若效果不佳，则采用C18反相色谱柱活化再生冲洗流程。1.  20倍柱体积水比乙腈 95比5，用于移出系统中缓冲盐，或者根据你使用的缓冲盐浓度来调整比例。2.  20倍柱体积乙腈3.  5倍柱体积异丙醇 4 .20倍柱体积正己烷 5.  20倍柱体积乙腈，20倍柱体积水比乙腈95比5，与1保持一致即可。
最后用所需要的流动相比例重新平衡色谱柱。柱体积计算公式 3.14（d/2）平方x l x0.68 其中，d为色谱柱内径，l为色谱柱长度，单位均为mm。
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Insm_e1a619b7
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2019/12/25 13:44:20 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 淹死的鱼??(Insm_b8558831) 发表:先采用楼上的方法处理。若效果不佳，则采用C18反相色谱柱活化再生冲洗流程。1.    20倍柱体积水比乙腈 95比5，用于移出系统中缓冲盐，或者根据你使用的缓冲盐浓度来调整比例。2.      20倍柱体积乙腈3.    5倍柱体积异丙醇 4 .20倍柱体积正己烷 5.      20倍柱体积乙腈，20倍柱体积水比乙腈95比5，与1保持一致即可。最后用所需要的流动相比例重新平衡色谱柱。柱体积计算公式 3.14（d/2）平方x l x0.68 其中，d为色谱柱内径，l为色谱柱长度，单位均为mm。
好的，谢谢^_^
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