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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】新手求助液相色谱问题

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发表于：2021/07/02 16:28:12 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
sec柱子分离纯蛋白，采用的流动相是ph为3的甲酸铵水溶液，出的峰为图一，降低流动浓度后峰为图二，原因是啥啊？感谢大佬的指导！
柱子是半年前买的，没用几次。
推荐答案：dadgoh回复于2021/07/06
低浓度下做一个紫外扫描，确认最大吸收是否偏移或减小。
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2021/7/5 8:39:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
降低流动浓度是什么浓度，建议使用原有流动相分析看看有没有再现性
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2021/7/5 8:41:41 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:降低流动浓度是什么浓度，建议使用原有流动相分析看看有没有再现性
原是20mmol/L甲酸安流动相，降低后是10mmol/L。重现性很好，做了五次都是这样子的
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有水有渝
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2021/7/6 9:04:26 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的是凝胶色谱柱吗，建议把色谱柱多清洗一下，流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试
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nuliyang
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2021/7/6 9:05:38 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:用的是凝胶色谱柱吗，建议把色谱柱多清洗一下，流动相恢复20mmol/L甲酸铵试试
是凝胶柱子
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dadgoh
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2021/7/6 12:26:54 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
低浓度下做一个紫外扫描，确认最大吸收是否偏移或减小。
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nuliyang
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2021/7/6 12:38:03 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我忘了说明了，图一（20mmol甲酸铵流动相）那个红色的是220nm波长，图二（10mmol甲酸铵流动相）那个黑色的是220nm。因为不是连续做的，所以颜色不一样。。。
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