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主题：【已应助】标准曲线绘制问题

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Ins_a3043655
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发表于：2021/10/08 17:24:58 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于紫外分光光度法绘制标准曲线问题，我们都知道好多曲线是需要用水或者其他基体做零浓度空白来计算校正吸光度，那么绘制标准曲线的时候包不包括坐标点（0，0）？
推荐答案：sdlzkw007回复于2021/10/08
理论上来说，标准曲线通过原点（软件可以选择）截距为零，可以准确测试低含量的样品，同样的不经过原点可以客观的反应空白（本底）的情况，有利于质量控制。
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sdlzkw007
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2021/10/8 18:07:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
理论上来说，标准曲线通过原点（软件可以选择）截距为零，可以准确测试低含量的样品，同样的不经过原点可以客观的反应空白（本底）的情况，有利于质量控制。
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通标小菜鸟
v3141805
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2021/10/8 18:20:34 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
虽然分光很多时候要求用空白基体加显色剂来作为零浓度点，但实际情况下测出来的值往往并不是真正坐标轴零点，还是带有一定的吸光度值用来反映背景值干扰。而楼主说的曲线要包括坐标轴（0，0），这个相当于已经是将曲线强制过0的意思了，一般不建议这么做的，强制过0虽然有利于低浓度点测定，但不利于实验者发现实验过程中引入的背景干扰
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mingxiaoyan
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2021/10/8 18:26:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般不包括零点，除非有特殊要求
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ztyzb
zxz19900120
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2021/10/8 19:51:02 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


个人理解不同政府部门的规定还是有差别的，上图是GB/T 5750.3明确提出了要包括零点但没说要扣除零点吸光值，这样有可能导致截距过大进而影响低浓度样品测量准确度；

一般环保行业标准都会提及“以扣白后吸光值对待测物质含量绘制标准曲线”，这其实是要求带入（0,0）绘制标准曲线（非过零点），另外《地表水环境质量监测网作业指导书》中对于部分指标截距都有要求（如氨氮要求截距≤±0.005）也验证了环保领域要求。

所以个人建议如果楼主从事环保领域紫外光度法检测的话带入（0,0）点进行计算。
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2021/10/8 19:52:04 Last edit by zxz19900120
JOE HUI
xurunjiao5339
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2021/10/9 5:45:04 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
标准曲线不一定非要过原点，只要线性好就可以了。因为做空白的话基本上不会过原点。过原点是强制过的，实际曲线可能不过，就会造成误差。不过原点是因为有系统误差。
在光谱法测定时浓度为零的标准溶液（本底）响应信号（吸光度）往往不是零，这个时候标准曲线就不一定过原点了。
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baizhengwei
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2021/10/9 10:58:35 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
“以扣白后吸光值对待测物质含量绘制标准曲线”，并不意味着一定强制过零点，因为工作曲线是回归得到的，正常情况下都会存在截距。扣除空白会使截距减小，但是虽然不扣空白会使截距增大，就工作曲线来讲，两条曲线的计算结果不会差的太大。如果本身存在截距，强制过零点，也不会使低含量的测定更准，有可能更不准。要想低含量测定的准，要尽可能都用低含量的标准溶液做工作曲线
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fenxiyuan
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2021/10/9 12:42:51 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
主要是空白试剂是否污染影响空白吸收值
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Ins_a3043655
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2021/10/9 13:42:43 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 通标小菜鸟(v3141805) 发表:
虽然分光很多时候要求用空白基体加显色剂来作为零浓度点，但实际情况下测出来的值往往并不是真正坐标轴零点，还是带有一定的吸光度值用来反映背景值干扰。而楼主说的曲线要包括坐标轴（0，0），这个相当于已经是将曲线强制过0的意思了，一般不建议这么做的，强制过0虽然有利于低浓度点测定，但不利于实验者发现实验过程中引入的背景干扰
也查了挺多资料，都没有明确的说法，个人感觉这个问题还是有挺大争论的，对于坐标点（0,0），代表的意思是以自身对自己进行校正，带入计算也并不能算是强制过原点，截距为零才能算是强制标准曲线过原点
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2021/10/9 13:49:08 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:
标准曲线不一定非要过原点，只要线性好就可以了。因为做空白的话基本上不会过原点。过原点是强制过的，实际曲线可能不过，就会造成误差。不过原点是因为有系统误差。
在光谱法测定时浓度为零的标准溶液（本底）响应信号（吸光度）往往不是零，这个时候标准曲线就不一定过原点了。
我的意思是以（0,0）坐标点和其余校正后的浓度、吸光度一起计算回归曲线，并不是强制回归曲线截距为零，不能算是强制过原点
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Ins_a3043655
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2021/10/9 14:03:30 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:
标准曲线不一定非要过原点，只要线性好就可以了。因为做空白的话基本上不会过原点。过原点是强制过的，实际曲线可能不过，就会造成误差。不过原点是因为有系统误差。
在光谱法测定时浓度为零的标准溶液（本底）响应信号（吸光度）往往不是零，这个时候标准曲线就不一定过原点了。
坐标点（0,0）参与回归计算并不是强制标准曲线过原点，强制过原点是强制截距为零；有些标准里对于零浓度点是否参与回归计算是有要求的，例如 GB/T 15516-1995 空气质量 甲醛的测定 乙酰丙酮分光光度法 中明确要求 “零”浓度不参与计算，那么对于一些标准里没有要求的，零浓度点是否参与回归计算？
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