主题：【已应助】液相色谱峰图有右肩峰，该怎么处理

三个原因：溶剂效应，柱头污染，两个物质没分开

出现肩峰或分叉
可能的原因 :
1.样品体积过大 : 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的 15%
2.样品溶剂过强 : 采用较弱的样品溶剂
3.柱塌陷或形成短路通道 : 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
4.柱内烧结不锈钢失效 : 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
5.进样器损坏 : 更换进样器转子

应该不是ph原因，换个新柱子可能就OK了

有几种可能：
浓度过载。就是样品浓度太高，所以会出现肩峰。
色谱柱填料塌陷。简单说就是柱子坏了，这样的话可能你图谱中所有的色谱峰都是有肩峰的。
溶剂和流动相差异。比如说，流动相是XX缓冲盐，溶剂是纯甲醇。那么样品从一个纯有机相环境到一个水相环境。一部分跟着有机相，一部分跟着水相，一前一后就出现肩峰了。
当然，也有可能是两个没分开的物质。比如，样品中有一个和它极性非常接近的物质，两者没办反完全分离，所以就出现了肩峰的状况。

先换根色谱柱看看，

咨询工程师

是第一次还是突然出现的。 第一次主要考虑样品浓度，方法的使用性包括溶剂和色谱柱。突然出现就是色谱柱出问题的概率大些

早上测样的谱图出了肩峰，如下图所示。

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如何判断该问题原因及解决呢？

首先，我们需要确定主峰后面的峰是杂质峰，还是主峰物质分化出来的。客户的LC 2010是PDA检测器，在再解析程序中，点开PDA数据处理，即可查看该谱图信息，如下图所示。

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在“等高线视图”中，选择相应的出峰时间（5.2min,5.7min）,可在右侧“光谱视图”中查看该出峰物质的光谱，从而判断两出峰物质的光谱谱图是否吻合。如吻合则是同一种物质，不吻合则说明是存在了其他杂质或分离效果不佳。

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如果引入了杂质的话，那么需要考虑样品处理过程是否污染，进样针是否污染，色谱流路/色谱柱是否有物质残留。相应的可以考虑保持样品处理无污染，进行进样针清洗操作，进行管路清洗（如异丙醇），更换保护柱，按照色谱柱使用说明洗脱色谱柱。

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情况分析

如果分离效果降低，则考虑更改流动相比例，提高分离度；或者需要更换色谱柱。

如果是同一种物质肩峰了，一般有两种可能：溶剂效应或色谱柱柱效降低。

溶剂效应大多是由于流动相的PH、流动相比例、样品溶剂及进样量的影响，此时可根据实际情况，调整流动相PH，流动相比例，更换与流动相相溶的样品溶剂或调整进样量。

柱效降低则是由于色谱柱长时间使用后，色谱柱出现坍塌，理论塔板数降低造成的。此时，可根据色谱柱的检测报告方法，测试其当前理论塔板数。比如常规C18柱，可使用乙腈-水（70:30）流动相，在254nm波长，1ml/min流速下，测定甲苯得出当前塔板数。当测定塔板数与新柱比较相差较大时，可以确定需更换新柱。

整体流程图如下：

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以上是对肩峰原因的一般分析过程。现在该客户的样品处理过程，清洗过程，以及样品方法都是没有改变过的，中途也未有其他污染源，色谱图上两个主要出峰都出现了肩峰的情况：从而可以判断是色谱柱柱效降低导致，在客户更换新柱后，肩峰情况消失，出峰正常。

我们都是好孩子

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