主题：【已应助】请问固相萃取小柱的活化液、淋洗液、洗脱液都是一样的吗？

1、固相萃取柱的活化：固相萃取柱活化的目的有两个，第一个目的是为了浸润填料、以便样品溶液能流过固相萃取柱；第二个目的是为了清洗固相萃取柱上面的干扰杂质以及溶剂残留。
2、淋洗：需要选择合适溶剂，既不会把吸附在固相萃取柱填料上面的目标产物洗掉，又能清洗掉一些干扰杂质，这个的选择也是根据既有方法来的，没有统一标准。
3、洗脱：选择合适的溶剂来把吸附在固相萃取柱填料上的目标物洗脱掉（大多数时候需要用试管来收集），这个溶剂也是根据具体实验方法来定的，无法统一规定。

固相萃取小柱的活化液、淋洗液、洗脱液都是一样的吗？
不一样，这个需要根据柱子类型选择

活化液
活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并除去柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务，第一个溶剂（初溶剂）用于净化固定相，另一个溶剂（终溶剂）用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约1-2mL/100mg 固定相。
无论固相萃取柱的来源或质量，未经活化都有可观的杂质存在。由于许多杂质能污染萃取后的分析物，故在样品萃取前必须除去这些杂质。除去杂质的最好方法就是用初溶剂，这样就可以除去所有可能与分析物一起洗出的物质；杂质除去不彻底，将导致最终色谱图上额外峰的干扰。
终溶剂不应强于样品溶剂，若使用太强的溶剂，将降低回收率。通常采用一个弱于样品溶液的溶剂不会有什么问题。在理想情况下，终溶剂应该与样品溶剂性质相似。例如，一个水样被HCl 调节到pH2，终溶剂（水）也应用HCl 调节到pH2。
值得注意的是，在活化的过程中和结束时，固定相都不能抽干，因为这将导致填料床出现裂缝，从而得到低的回收率和重现性，样品也没得到应有的净化。如果在活化步骤中出现干裂，所有活化骤都得重复。
在建立固相萃取方法时，柱的活化经常被忽视。其实不当的活化经常是低回收率、失败的样品净化或重现性差的来源。

淋洗液
分析物得到保留后，通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分，淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。淋洗溶剂必须尽量地弱以洗掉尽量多的干扰组分，但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。溶剂体积可为0.5-0.8 mL/100 mg 固定相。淋洗步骤也能确保全部样品与固定相接触，因为上样时部分样品溶剂的小液滴可能还沾在管壁上，淋洗溶剂可把液滴全部洗入固定相。有时候淋洗步骤也许并不十分重要，但淋洗总能得到更干净的样品，从而得到更简单的谱图和更长的gc 或HPLC 柱寿命。

洗脱液
淋洗过后，将分析物从固定相上洗脱。洗脱溶剂用量一般是0.5-0.8 mL/100 mg 固定相，而溶剂必须进行认真选择。溶剂太强，一些更强保留的不必要组分将被洗出来；溶剂太弱，就需要更多的洗脱液来洗出分析物，这样固相萃取柱的浓缩功效就会削弱。收集起来的洗脱液可以直接向色谱柱进样，也可以把它浓缩后溶于另一溶剂中进样和进一步净化。

原文由 mingxiaoyan(mingxiaoyan) 发表:
活化液
活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并除去柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务，第一个溶剂（初溶剂）用于净化固定相，另一个溶剂（终溶剂）用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约1-2mL/100mg 固定相。
无论固相萃取柱的来源或质量，未经活化都有可观的杂质存在。由于许多杂质能污染萃取后的分析物，故在样品萃取前必须除去这些杂质。除去杂质的最好方法就是用初溶剂，这样就可以除去所有可能与分析物一起洗出的物质；杂质除去不彻底，将导致最终色谱图上额外峰的干扰。
终溶剂不应强于样品溶剂，若使用太强的溶剂，将降低回收率。通常采用一个弱于样品溶液的溶剂不会有什么问题。在理想情况下，终溶剂应该与样品溶剂性质相似。例如，一个水样被HCl 调节到pH2，终溶剂（水）也应用HCl 调节到pH2。
值得注意的是，在活化的过程中和结束时，固定相都不能抽干，因为这将导致填料床出现裂缝，从而得到低的回收率和重现性，样品也没得到应有的净化。如果在活化步骤中出现干裂，所有活化骤都得重复。
在建立固相萃取方法时，柱的活化经常被忽视。其实不当的活化经常是低回收率、失败的样品净化或重现性差的来源。

淋洗液
分析物得到保留后，通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分，淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。淋洗溶剂必须尽量地弱以洗掉尽量多的干扰组分，但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。溶剂体积可为0.5-0.8 mL/100 mg 固定相。淋洗步骤也能确保全部样品与固定相接触，因为上样时部分样品溶剂的小液滴可能还沾在管壁上，淋洗溶剂可把液滴全部洗入固定相。有时候淋洗步骤也许并不十分重要，但淋洗总能得到更干净的样品，从而得到更简单的谱图和更长的gc 或HPLC 柱寿命。

洗脱液
淋洗过后，将分析物从固定相上洗脱。洗脱溶剂用量一般是0.5-0.8 mL/100 mg 固定相，而溶剂必须进行认真选择。溶剂太强，一些更强保留的不必要组分将被洗出来；溶剂太弱，就需要更多的洗脱液来洗出分析物，这样固相萃取柱的浓缩功效就会削弱。收集起来的洗脱液可以直接向色谱柱进样，也可以把它浓缩后溶于另一溶剂中进样和进一步净化。

文中溶剂的强和弱具体指的是什么？和溶剂极性的强弱不是一回事吧？如何判断强弱？

溶剂的极性强弱有个顺序表，在百度上可以看到。

原文由 cadicy(cadicy) 发表: 文中溶剂的强和弱具体指的是什么？和溶剂极性的强弱不是一回事吧？如何判断强弱？

强弱是相对的于极性大小来说的

咨询工程师

1，活化液的作用，我们通常拿到柱子是干的，除了一些特殊的，如免疫亲和柱，对于干的柱子，加入活化液，是为了去掉一些杂质，另一个是使我们的固定相的基团舒展开了，一般活化液为固定相相反极性。2，淋洗液，主要是淋洗掉那些被固定相同时吸附但不是我们目标物的物质。这个淋洗液既不能冲洗掉我们的目标物，又要冲洗掉一些固定相所吸附较弱的杂质。简单的来说就是在目标物与固定相之间的吸附力大于目标物在淋洗液中的作用力，杂质与固定相的吸附力小于杂质在淋洗液中的作用力，这样就能把杂质淋洗下来。3，洗脱液，将目标物从固定相所洗脱下来。收集，旋蒸或者氮吹，进行复溶。杂质较多的时候可以使用俩种或者多种不同种的柱子进行净化，尽可能的降低其它干扰，当然使用多个柱子，会拉长前处理时间，回收率存在不稳定因素增多等不方便之处。

查溶剂极性表，pka值

需要进行选择