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液相色谱（LC）

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主题：【悬赏帖】液相色谱峰面积一个峰分裂成两个峰，是什么原因？

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Ins_7063da0b

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发表于：2024/06/19 13:32:49 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

悬赏金额：10积分状态：未解决

最近发现液相峰面积一个峰分裂成两个峰，怀疑是柱子污染了，但是昨天用10%甲醇冲一小时，100%甲醇冲半小时，今天看并没有什么用，还是那样子，请各位大神帮忙分析下，这种情况应该怎么解决？

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2024/6/20 10:42:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相色谱中，一个峰分裂成两个峰可能是由多种原因引起的，以下是一些常见的原因：
样品的化学异质性：如果样品中含有具有相似化学性质但结构略有不同的组分，它们可能在色谱柱上具有非常接近的保留时间，导致在一个峰中分离。
色谱柱老化或损坏：色谱柱的性能下降，如柱效降低，可能导致峰形变宽和峰分裂。
样品过载：样品浓度过高可能导致峰形变宽和峰分裂，特别是在样品中的某些组分浓度远高于其他组分时。
流动相组成变化：流动相的组成（如缓冲液的pH值或有机溶剂的比例）对色谱分离有重要影响。流动相组成的变化可能导致峰形变化。
温度变化：色谱柱或系统的温度变化会影响组分的保留时间和峰形。
色谱柱填充不均匀：色谱柱填充不均匀或存在空隙，可能导致峰形异常。
样品溶剂效应：样品溶剂与流动相不兼容或样品溶剂强度过高，可能导致峰分裂。
柱温变化：柱温的不稳定性或程序升温设置不当，可能导致峰分裂。
检测器时间常数设置不当：如果检测器的时间常数设置过长，可能导致峰形变宽和分裂。
样品制备问题：样品制备过程中的不均匀性或杂质的存在，可能导致峰分裂。
色谱系统死体积：色谱系统中的死体积（如柱接头、管路等）可能导致峰分裂。
色谱柱选择不当：使用的色谱柱可能不适合分析特定的样品，导致峰分裂。
解决峰分裂问题通常需要对上述因素进行逐一排查和调整。可能的解决措施包括更换色谱柱、优化样品制备方法、调整流动相组成、控制柱温和系统温度、优化检测器设置等。在某些情况下，可能需要使用更高分辨率的色谱柱或改变色谱条件来实现更好的分离。

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液相色谱柱修复

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2024/6/20 10:57:30 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以考虑增加冲洗强度，反相柱的话可以考虑使用异丙醇、四氢呋喃冲洗。还是没效果可以考虑修复色谱柱，

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sdzb1982

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2024/6/20 12:10:59 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1、可能柱头塌陷
2、溶剂效应：样品溶液与流动相极性相差太大，样品溶解后尽量再用流动相稀释。

3、流动相与你检测物不匹配，流动相的缓冲能力不够，无法抑制以一种形式出现。在一个特定的条件下(如pH值、流动相极性、温度等)，一种物质将出现双峰，双峰靠的很近，条件稍一变化，尤其pH，双峰现象将消失。

可以试试增加缓冲盐浓度，或增加，减少1个PH单位试试。

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2024/6/21 14:24:03 Last edit by sepu007