【原创】对于梯度洗脱的一点总结

雪妖

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2008/5/27 19:31:06 21楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 susanzxh123 发表:
你好，您说的梯度洗脱时，用恒流指的是不改变流速吗》？
如果改变了，有啥结果？
我正试着用梯度洗脱做一个指纹，改变了流速。不知是啥原因，都难以得到较好的分离效果，我的流动相也用到了磷酸缓冲盐，不知有不有影响？

用恒流泵是指你设定的流速不会因为压力的改变而改变，这样分的话泵分为恒压泵和恒流泵。

你用缓冲盐走梯度你要注意点不要有机相太多了，盐析出来了

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otsukatao

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2008/5/28 11:12:03 22楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 ximeng2007 发表:
只要液相色谱仪配有梯度洗脱装置都可以进行梯度洗脱，梯度洗脱的原理是一样的，即通过改变流动相中各溶剂组成的比例来改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子，并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。
对一未知样品进行分析分离时，首先要进行摸索以确定适合用等度洗脱还是梯度洗脱；对于复杂的分析样品采用梯度洗脱能够缩短分离时间，实现很好的分离。

楼主和ximeng2007发表的都很经典啊！
多谢！

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义熙

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2008/5/29 18:54:07 23楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

因为纯的乙腈容易使单向阀里的红宝石粘连在球座上，你把乙腈配置成一定的浓度再用，我一般是80%的乙腈水溶液，试试吧。

我们平时走样品是也是用乙腈的水溶液走梯度。但是经常是用纯乙腈冲洗symmetry的柱子，最近我们HPLC的压力波动很大，有时候从好几百一下就降到0，出现这样的问题不知道是不是什么问题？是单向阀的原因吗？

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