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主题：【每周讨论6】你使用缓冲溶液吗？使用缓冲溶液应注意哪些方面？

浏览0 回复31 电梯直达
阿du
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发表于：2008/06/25 10:13:22 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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缓冲溶液经常作为流动相使用，其为系统提供了稳定的PH范围，改善了分离和峰形。
那么，在使用缓冲溶液作流动相时，应注意哪些方面？
作为本期讨论话题，大家可从配制、使用、清洗、维护、色谱柱、泵等各个方面说下自己的观点。

小结：

1、配制时注意调节PH值。
2、使用前注意过滤和脱气。
3、流动相切换时注意含有少量有机相的水充分置换、过渡，不可直接用有机相替换，防止盐析出。
4、做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜，使用后应置换成有机相。
5、泵头用纯水清洗干净；进样阀也需清洗。
6、配好的缓冲盐溶液不要长时间使用，最好2--3天重新更换（易滋生微生物）。
7、磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应临用现制。
8、容器应定期清洗，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。
9、应选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液（浓度稀也具有较强能力的缓冲液）
10、 即使确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）

推荐答案：活到九十 学到一百回复于2008/06/25

配制时应注意调节PH值，用前注意过滤和脱气；使用时注意不能和其它有机溶剂直接混合，应以水作过渡；使用后先用含有少量有机相的水充分置换；泵头用纯水冲洗干净；做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜；配好的缓冲盐溶液不要长时间使用，最好2--3天重新更换。
补充答案：

我的8090回复于2008/06/25


多了易影响峰型哈

hrcren回复于2008/08/10

1、配制：0.45um滤膜过滤除去不溶杂质；
2、脱气：超声或脱气机脱气，避免空气进入色谱柱和检测器；
3、冲洗：使用完缓冲液后，要冲洗干净，不能有残留，否则会损坏高压泵及密封垫圈。
4、防漏：管路的其他部分也要严格密封，不能有漏点，否则漏出的缓冲液会析出无机盐，使管路部件的密封性越变越差。
暂时想到的只有这些。

yzlbq回复于2008/06/25

关于缓冲溶液的配制要赶除二氧化碳所以要将水溶液加热煮沸，在静置过程中遇到问题：一：如果时夏秋时节放在室温下冷却需要最少1.5小时即使放水冷却也需要1小时左右而且还要经常换水，结果还是不是想要的水，二：这种方法处理二氧化碳水费时费事有没有新方法。
希望能有高手指教！

jumpingli回复于2008/06/25

缓冲溶液我们在配制的时候都用专用容器，超纯水，通过0.45微米滤膜过滤，在使用的前一天配制，夏季要经常更换，容易滋生细菌藻类等

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2008/6/25 10:33:50 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 duliuhui 发表:
缓冲溶液经常作为流动相使用，其为系统提供了稳定的PH范围，改善了分离和峰形。
那么，在使用缓冲溶液作流动相时，应注意哪些方面？
作为本期讨论话题，大家可从配制、使用、清洗、维护、色谱柱、泵等各个方面说下自己的观点。

配制时应注意调节PH值，用前注意过滤和脱气；使用时注意不能和其它有机溶剂直接混合，应以水作过渡；使用后先用含有少量有机相的水充分置换；泵头用纯水冲洗干净；做好不要让含有缓冲盐的流动相在系统或色谱柱中过夜；配好的缓冲盐溶液不要长时间使用，最好2--3天重新更换。
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天空之城
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2008/6/25 10:46:37 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、配制前注意pH的调节，混合均匀后冷却至室温再超声；
2、使用的话，我一般用的都是不含盐的，所以只要在开泵前赶走管子中的气泡就好；
3、清洗：我们是先用纯水冲洗半个小时，再用甲醇冲洗；
4、一般的缓冲溶液如果用不频繁的话，下次用之前最好重新配制，由于是缓冲溶液，里面很有可能滋生微生物，对柱子不好，也对结果有所影响
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yzlbq
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2008/6/25 14:40:22 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
关于缓冲溶液的配制要赶除二氧化碳所以要将水溶液加热煮沸，在静置过程中遇到问题：一：如果时夏秋时节放在室温下冷却需要最少1.5小时即使放水冷却也需要1小时左右而且还要经常换水，结果还是不是想要的水，二：这种方法处理二氧化碳水费时费事有没有新方法。
希望能有高手指教！
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wjm7578
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2008/6/25 14:54:19 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、配制时如果用磷酸调pH一定要慢慢慢。

2、使用时，管路最好先用纯水替换后再平衡色谱柱。

3、冬天使用一定要保证实验室的温度，防止盐析出。
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麦 兜
chemsay
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2008/6/25 15:17:30 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
路过，顺便学习一下！！
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It is me!
hmzhou83
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2008/6/25 15:18:48 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
缓冲液使用分析纯的试剂，配置后调节pH,再过滤再脱气，每天更换。比较注意的是停机之前要冲去系统里存在的缓冲液，主要是考虑到其中的盐分影响。要是短时间就无所谓了。
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alex1975
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2008/6/25 15:24:00 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
pH值的测定要精确，较长时间不用，过一下滤膜也能用的
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面对面想你
jackcong
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2008/6/25 15:35:14 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 110003 发表:
1、配制前注意pH的调节，混合均匀后冷却至室温再超声；
2、使用的话，我一般用的都是不含盐的，所以只要在开泵前赶走管子中的气泡就好；
3、清洗：我们是先用纯水冲洗半个小时，再用甲醇冲洗；
4、一般的缓冲溶液如果用不频繁的话，下次用之前最好重新配制，由于是缓冲溶液，里面很有可能滋生微生物，对柱子不好，也对结果有所影响


写得很好噢，顺便弱弱地问下，PH调节为什么要超声呢？
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阿du
duliuhui
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2008/6/25 15:55:59 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 jackcong 发表:
原文由 110003 发表:
1、配制前注意pH的调节，混合均匀后冷却至室温再超声；
2、使用的话，我一般用的都是不含盐的，所以只要在开泵前赶走管子中的气泡就好；
3、清洗：我们是先用纯水冲洗半个小时，再用甲醇冲洗；
4、一般的缓冲溶液如果用不频繁的话，下次用之前最好重新配制，由于是缓冲溶液，里面很有可能滋生微生物，对柱子不好，也对结果有所影响


写得很好噢，顺便弱弱地问下，PH调节为什么要超声呢？

作为移动相，是需要脱气处理的。
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jumpingli
pjl52107158
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2008/6/25 17:10:34 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
缓冲溶液我们在配制的时候都用专用容器，超纯水，通过0.45微米滤膜过滤，在使用的前一天配制，夏季要经常更换，容易滋生细菌藻类等
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