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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【讨论】可见光分光光度计和紫外分光光度计的思考

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novodisk
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2008/8/27 10:40:53 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
补充一下：

目前做的是蛋白酶的分析，使用酪蛋白做底物，在目前的行业标准中，可见光显色法是第一法，紫外法是第二法，两者的前期处理是一样的，只是可见光多了一个步骤，那就是显色，紫外法直接读数而已。显色法所用的显色剂配制十分麻烦，相对来说，紫外法要简单很多了，努力提高紫外法的准确率很有意义。
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happy美丽
dyann
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2008/8/27 10:46:07 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 novodisk 发表:
补充一下：

目前做的是蛋白酶的分析，使用酪蛋白做底物，在目前的行业标准中，可见光显色法是第一法，紫外法是第二法，两者的前期处理是一样的，只是可见光多了一个步骤，那就是显色，紫外法直接读数而已。显色法所用的显色剂配制十分麻烦，相对来说，紫外法要简单很多了，努力提高紫外法的准确率很有意义。


------我觉得你可以先做个比较,根据素得结果决定采用的方法
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辛勤的蚂蚁
hbyjfz
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2008/8/27 10:46:10 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也认为根据自己实验的要求来确定用什么样的方法。哈哈
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迷失的精灵
melu
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2008/8/27 10:51:40 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
虽然紫外的专属性好,误差较小,但时建议还是兩個都做一下,比较一下差異!
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yangjianqin
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2008/8/27 10:52:22 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
测量前应先确定最大吸收波长，原则上选最大吸收波长为测量波长，如果最大吸收波比较尖锐，应选次最大吸收波长较好。不知你选的测量波长到底是如何确定的。
    仪器的好坏，要视光学系统而定。
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novodisk
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2008/8/27 10:52:57 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其实就是想知道大家平时的紫外是怎么做的，我因为做得少，经验有限，也许好多应该注意的没有重视起来。
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老万
ktts
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2008/8/27 11:01:32 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于测定有国标等成熟方法标准的样品用紫外做可以的，毕竟比较方便
至于开发新方法，肯定两者都要做一下，比较一下
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novodisk
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2008/8/27 11:04:18 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yangjianqin 发表:
测量前应先确定最大吸收波长，原则上选最大吸收波长为测量波长，如果最大吸收波比较尖锐，应选次最大吸收波长较好。不知你选的测量波长到底是如何确定的。
    仪器的好坏，要视光学系统而定。


这是行业标准的方法，我们也做了全波扫描，测量用的波长就是最大吸收波长，测试了好几个缓冲溶液，其中的一个缓冲溶液比较怪异，没有明显的波峰，而是像波浪一样起伏，具体原因还不清楚。
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qryangqiang
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2008/8/27 11:27:40 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 amanda_gx 发表:
你可以兩個都做一下，對比結果的差異，如果有標準樣品的話，也可乘機做一個方法的確認。

是啊，做方法要有对照品就要按对照品的方法，还有反复的做对比，看哪个的稳定性好，有没有线性关系。可见光分光光度计和紫外分光光度计都有他的优点和缺点，要看分析的物质成分来优选哪个。
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xinyuhuabo
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2008/8/27 11:42:13 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我也有同感，用紫外时不稳定，用可见时较稳定，但紫外读数时较方便，读数精度较高，可能也是此缘故吧。
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