主题:【论坛原创之星】之:由生手转变成相对熟手全过程—使用TSQ finnigan液相质谱心得以及维护体会

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zhufangwei
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由于课题的原因,得以用上TSQ finnigan 液相质谱联用仪。这台仪器也没买多久,实验室参加工程师培训的就一两个,而且我也没赶上。起始没有一个很清晰的认识,一开始总的认识是液相质谱与液相的区别是检测器的不同,液相质谱的是质谱检测器,而液相的则是紫外检测器等,周围的人多是这么说的。只能跟着会的人打打下手,在旁边看看,没有操作仪器的机会,因为老师怕仪器受到损害,一百多万的东西毕竟看起来很精贵。在这种情况下,我觉得首先了解液相质谱的一些基本原理、熟悉该仪器的操作软件是至关重要的。刚好老师给了我工程师参加培训时留下的幻灯片,我就死啃幻灯片,第一遍是看不太懂的,里面理论的东西很多,而且很多东西就要试着记下,后来看了好多遍才慢慢熟悉起来。基本上搞清楚了是怎么回事,可是实际操作与此相差很大,因为幻灯片上的东西讲的都太全,甚至根本用不上,而且看了也太懂不明白,只是达到了熟悉软件和了解基本原理的目的。操作软件上的东西看起来很复杂而仅仅一部分是需要人为操作的。熟悉软件知道了那些图标表示的意思,我很快就能上手,不然别人操作半天你在旁边看也不明白是怎么回事,因为都有试验任务,也不可能手把手教你,给你讲的一清二楚。


      熟悉了软件以及基本的原理之后就开始慢慢的学着操作了,因为别人在做试验的时候可以帮着弄弄。一开始还是不太敢碰的,因为毕竟不是很懂。慢慢的知道了怎么排气泡,然后就是怎么操作液相泵,调流动相的比例。我就列举几个我碰到的小麻烦。记得有一次排气泡的时候忘了拧开那个purge阀,搞的报警着实让我慌了一下,呵呵,后来打电话问师兄才知道clear那个错误才不会叫的。有一次遇到系统压力不稳的情况,压力不断的变化,从低到高,然后又从高到低不断的跳动,后来把色谱柱卸下来也还是那样,根本就没办法进样。反复purge了好几次还是那样,后来打电话问过工程师,说了很多可能的原因。而我只有捡自己能做的尝试,原来是因为流动相超声的时间不够,因为哪个时候是冬天,以前只需要超声十几分钟,现在必须超声二十多分钟,因为天气比较冷气泡不容易超尽,当时的却对于超声这回事都没有太在意,还好终于解决了,所以以后我都宁愿超声时间长一些保险。然后就是质谱那一块,看着常见的操作就是取下离子源的区域,摘下Ion sweep cone以及离子传输管清洗。老师反复强调操作之前必须看一下真空度,要达到4e-6水平,看看氮气压力够不够,泵油的位置,这些精炼而使用的前操作似乎成了潜意识一下就能意识到的东西。在直接优化的时候也是个问题,完全不懂优化的过程,因为参数太多,也不是尽要优化的,记住一些关键的地方是很重要的。后来看了很多资料,基本了解了各个参数的作用以及优化的目的,才慢慢会看优化的具体过程。也碰到过优化出错的情况,因为当时氮气压力有点低,所以优化出来的鞘气压力和辅助气压都比较高,超出了应该在的范围。而且以前也没有太在意优化的时候标样必须要达到的强度,因为只有这样才能保证优化的各参数可靠性。


      可能是我运气不好,很多棘手的问题都被我碰到了,在走标样的时候竟然不出峰了,反复尝试了好多遍都这样,卸下色谱柱也是这样,请工程师过来修也一下耽搁了好几个月的时间。当时过来之后也觉得很奇怪,只能液相、质谱部分一部分的排查,单独进质谱发现是有信号的,确定是液相那部分的原因,初步估计是液相部分有的地方堵了。然而液相排查的话就必须有配件来更换,所以从进样针,以及管路、定量环都进行了更换,工程师觉得是自动进样器的注射泵的问题,因为有很明显的噪声,可以看到有明显的漏液情况,后来搞了很久,因为配件寄错过一次。同时在此期间我也看了很多关于该仪器结构方面的资料,都是英文的,很具有挑战性。我边看边去实地操作的,因为我也想找找原因,对于这些部分都相当的熟悉了。后来换上之后就好了,在其中还出现过一个小插曲,那就是不知道进样托盘的类型怎么变动了,成了96孔板的进样托盘类型,因为不同的托盘类型自动进样器扎的深浅不一样,后来调成响应的托盘类型就好了,工程师认为是这个原因导致的没有信号。可是在此期间,我也确认过这个地方,我觉得还是注射泵的原因才是真正的原因。


      不得不承认的是因为这些遇到的问题,让我在逼不得已的情况下学习了很多相关的资料,学习到了很多解决问题的方法。如果试验进行的很顺利的话,也许我不会去看去学,所以我觉得遇到问题也不一定是什么坏事吧。


      不想写的篇幅太长话太多,下面我就简洁的列出一些操作过程中的体会和维护经验供大家分享。


    操作之前:(1)查看仪器房间温度(20-30度)和湿度(40%左右)是否在适宜的范围,这个一般都是固定了的,不需要管太多,如果遇到几台仪器同一房间对温度要求都很严格时就需要协调,见图1、图2,改善湿度和减少灰尘的方法可以使用吸湿器和除尘器,见图3和图4,如果湿度过高和灰尘均会对仪器内部造成损伤;


(2)要查看气体的压力是否在适当的范围包括液氮(要求在0.7MPa左右最好)和氩气(在0.2MPa左右),见图5、图6;


(3)查看真空度Ion Gauge Pressure(Torr)的情况,要求在e-6水平。查看泵油线的水平,要求在最不超过最高线(因为会溢出)和最低线(泵油如果不够真空度会达不到那么高)之间,见图7中上下刻度线;


(4)查看表示离子传输管是否堵塞的压力值Fore pump pressure(Torr),一般是在1.5以下,如果低于1.0说明离子传输管已经堵塞必须清洗。调谐时:保证气体压力是满足要求的,压力不够会导致所优化参数虚高而不可靠。所进标样达到的强度正离子必须在e7水平,负离子必须在e6水平才能往下继续优化,否则离子强度不稳会导致优化参数不可靠。一般选择离子传输管温度为350度,调谐时注意查看所显示的优化提高的情况,注意会可能会发生的出错的情况就要重新优化。调谐完后使用高流速甲醇冲洗管路,因为很容易造成污染。


size=4]进样时:一般流动相超声时间要充分,在15分钟左右,天气变冷应适当延长时间。必须提前平衡色谱柱,最好设定色谱柱温度在30-40度以保证色谱柱的稳定,可以通过高流速缩短平衡的时间。


进样后:一定要记得冲洗管路,特别是流动相中使用了缓冲盐的情况,因为长时间不洗,会造成堵塞严重的情况,系统压力明显增加,常常不得不对毛细管进行切割。0.2mL/min压力会达到1800psi左右,正常压力整个流路也就在1000psi左右,当然与流动相的比例也是关系很大的。首先使用50%甲醇水或乙腈水高流速冲洗,该情况不进质谱,冲洗时间充分后切入质谱对毛细管部分进行冲洗。然后又切至废液使用纯甲醇和乙腈高流速进行冲洗,然后切入质谱对于毛细管部分进行冲洗。这样做之后发生堵塞的情况几乎没有发生。离子传输管的温度要降至200度以延长使用寿命,使用堵头堵住离子传输管口。为了保护机械泵,每个星期振一下半个小时的气我觉得还是很有必要的。

以下列举两个很典型的仪器故障例子:
(1)前不久遇到的仪器鞘气压力和辅助气压力不受控制故障
在进行样品优化过程中突然留意到鞘气压力和辅助气压力优化出错,始终以五十多的值出现,然后自己手动调节也不受控制。经过工程师的检查,发现是电路板的问题,控制鞘气和辅助气的电子流量阀出现了故障。在拆下电路板观看时,发现了一个很小的白色的固体物,是导致电子流量阀产生故障的原因。该物是在换液氮的时候不小心带入的,因为在换液氮罐的时候为了保证不漏气使用了白色的密封胶,在拧紧的过程中导致该白色物混入管道,而且平时不小心气压过大,对电路板上电子流量阀有极大的损伤。后来只有换了一块电路板才解决问题的,还好是在保修期,要不然这块板子要花2万块。我想这是大家平时都应该注意的。


(2)遇到机械泵的周围有油情况,见图8。
机械泵的周围总会出现黄色的油状物,打扫干净之后,隔一段时间又会有,我觉得是不是因为没有振气所导致,由于泵在运作时温度相对高而产生的油蒸汽在泵的周围遇冷,从而形成的油状物。


(3)遇到的转子密封圈漏液情况,见图9。
当转换LOAD和INJECT键时发现有明显的液体从孔中流出,因为流动相中常时间使用缓冲盐而造成的,更换了转子密封圈后漏夜问题得到解决。

    没有写的很全,提了一些很典型的事件,希望大家来批评指正哦!!!

    由于不能超过7000个字符,所以图只能放到下面了,图片是我自己在实验室照的,呵呵!!!









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图1 温湿计



图2 空调控温




图3 除湿器



图4 除尘器



图5 氩气压力表显示



图6 氮气压力表显示 右边



图7 机械泵油上下刻度线



图8 机械泵周围出现黄色油状物



图9 转子密封圈漏液
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挺详细的啊.
不过,LZ的压力表好象没计量校验标签啊.可得注意安全!
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太好了!我现在的状态就像楼主刚开始一样!用的也是thermo TSQ Quantum 机器,借问一下楼主有没有好的资料共享一下,不胜感激!
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原文由 wangjiaqing 发表:
太好了!我现在的状态就像楼主刚开始一样!用的也是thermo TSQ Quantum 机器,借问一下楼主有没有好的资料共享一下,不胜感激!



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zhufangwei
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原文由 kanjianwei 发表:
挺详细的啊.
不过,LZ的压力表好象没计量校验标签啊.可得注意安全!


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