主题：【求助】【解读样本参数—LC篇】液相色谱仪器检测器篇样本参数（有重奖）

太专业的问题了，看来还有好多知识要学习啊

①紫外检测的噪音是怎么计算的？噪音的<±n＊10-5（AU at 254nm）这个参数是什么意思？单位表示的是什么？参数越大越好还是越小越好？合适的指标应该是多少？
选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0 mL/min,紫外检测器的波长选在254 nm,检测灵敏度调到最灵敏挡。开机预热，待仪器稳定后记录基线30 min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应的坐标，计算基线噪声，用检测器自身的物理量(AU)作单位表示。
Nd＝KB
Nd：检测器的基线噪声
K：衰减倍数
B:测得的基线峰-峰高对应的标度，AU
（AU就是吸收度单位(absorbance unit)，通过公式换算。你物理上测得物质的透光率，然后取负对数得到吸收度。1.0对应90%的吸收，即透过了0.1，取10为底数的负对数值得到1.0,2.0对应99%的吸收，即透过了0.01，取10为底数的负对数值得到2.0.）
基线噪声小些好，一般液相的紫外检测器检定要求基线噪声<5＊10-4 AU 。


②紫外检测的漂移是怎么计算的？漂移的<m＊10-4（AU/h）值是怎么计算的？其单位表示什么意思？漂移数值的大小有何优缺点？在购买仪器的时候什么样的参数才算是最合理的？基线漂移用1h内基线偏离原点的值(AU/h)表示.本人理解就是一个小时内，纵坐标相差的最大值。
漂移也是小些好啦，一般液相的紫外检测器检定要求基线噪声<5＊10-3 AU/h

③示差检测器噪音是怎么计算的？噪音的单位表示什么意思？数值的大小对选购仪器有何优缺点？选择什么数值最为合适？为什么与紫外检测器的大小和单位都不一样？
④示差检测器的基线漂移大小是根据什么来的？如何计算出来的？单位是根据什么来的？数值的大小对购买仪器的好坏之处是什么？理由

示差检测器的基线噪声和漂移的测定基本通紫外检测器：选用C18色谱柱，将仪器各部分联接好，以HPLC用水为流动相，流量为]mL/min,参比池充满流动相，步骤相同，但是用检测器自身的物理量(RIU)表示。(实验中应特别注意，室
温的波动不要超过2℃)。
数值当然也是越小越好，但是要求基线噪声<5×10-7 RIU,基线漂移<5×10-6 RIU/h。

指标越好估计价格也越贵吧，根据需要选择合适的就行。

看了这些东西，越发的觉得自己就是个液相盲！！！

1）相关原理等问题：
①紫外检测器与示差检测器原理是什么？
紫外检测器的工作原理是Lambert-Beer定律，即当一束单色光透过流动池时，若流动相不吸收光，则吸收度A与吸光组分的浓度C和流动池的光径长度L成正比.
示差检测器是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的，属偏转式类型。光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像，并作为检测池的入射光，出射光照在反射镜上，光被反射，又入射到检测池上，出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂，当参比池和测量池流过相同的溶剂时，使照在双光敏电阻的光量相同，此时桥路平衡，输出为零。当测量池中流过被测样品时，引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转，使双光敏电阻阻值发生变化，此时由电桥输出讯号，即反映了样品浓度的变化情况。

②各自的用途？
紫外检测器对占物质总数约80%的有紫外吸收的物质均可检测，既可测190--350 nm范围的光吸收变化，也可向可见光范围350---700 nm延伸。
示差检测器属于通用性检测器，如果选择合适的溶剂，几乎所有的物质都可以进行检测。

③它们有什么各自优点？
  紫外检测器灵敏度高，噪音低，线性范围宽，对流速和温度均不敏感，可于制备色谱。由于灵敏高，因此既使是那些光吸收小、消光系数低的物质也可用UV检测器进行微量分析。
示差折光检测器是目前液相色谱中常用的一种检测器，它可与输液泵，色谱柱，进样器等组成凝胶渗透色谱仪或高速液相色谱仪系统，也可以配置适当的进样系统作为单独的分析仪器使用。对所有溶质都有响应，某些不能用选择性检测器检测的组分，如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等，可用示差检测器检测。由于不同的液体折光不同，因此本检测器通用性强，可广泛地应用于化工、石油、医药、食品等领域为科研、生产服务。

④它们之间的区别？
1.紫外是选择性检测器，示差是通用性检测器；
2.紫外检测器灵敏度高，示差检测器灵敏度低；
3.紫外检测器可进行梯度洗脱，示差检测器不能进行梯度洗脱；
4.紫外检测器对压力和温度不敏感，示差检测器很敏感。

您们回答太完全了哈

我就特不喜欢我那台灵敏度不能调节，做有关物质吸收不大时 出峰总是不好看！

①紫外检测器与示差检测器原理是什么?

蒸发光散射检测器消除了常见于其他HPLC检测器的问题。示差检测受溶剂前沿峰的干扰使得分析复杂化，并且由于对温度极其敏感使得基线很不稳定，与梯度洗脱不相容。另外，示差检测器的响应不如ELSD灵敏。而低波长紫外检测器在急变梯度条件下受基线漂移的困扰，并要求被分析化合物带有发色团。ELSD则不受这些限制。不同于这些检测器，ELSD能在多溶剂梯度的情况下获得稳定的基线，使得分辨率更好、分离速度更快。另外，因为ELSD的响应不依赖于样品的光学特性，所以ELSD检测时样品不要求带有发色团或荧光基团。

操作原理

蒸发光散射检测器的独特检测原理为，首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶，然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发，最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中得到检测。

步骤1：雾化



雾化

经HPLC分离的柱洗脱液进入雾化器，在此与稳定的雾化气体（一般为氮气）混合形成气溶胶。气溶胶由均匀分布的液滴组成，液滴大小取决于分析中采用的气体流量。气体流量越低形成的液滴越大，液滴越大则散射的光越多，从而提高了分析灵敏度，但是越大的液滴在漂移管中越难蒸发。每种方法均存在产生最佳信号噪音比率的最优化气体流量。流动相流速越低要求适当雾化的气体流量也越低。用内径为2.1mm的微径柱代替内径为4.6mm标准型分析柱，能大大降低流动相流速，因而提高分析的灵敏度。

步骤2：蒸发



蒸发

气溶胶中挥发性成分在加热的不锈钢漂移管中蒸发。为特定应用设置适当的漂移管温度，取决于流动相组成和流速，以及样品的挥发性。高有机含量流动相比高含水量流动相要求蒸发的漂移管温度低。流动相流速越低比流动相流速越高要求蒸发的漂移管温度越低。半挥发性样品要求采用较低的漂移管温度，以获得最佳灵敏度。最佳温度需要通过观察各温度时的信号噪音比率来确定。

步骤3：检测



检测

悬浮于流动相蒸汽中的样品颗粒从漂移管进入到光散射检测池。在检测池中，样品颗粒散射激光光源发出的光而蒸发的流动相不散射。散射光被硅光电二极管检测，产生电信号输送模拟信号输出端口，被用于模拟输出的数据采集。


对于偏转式示差折光检测器，光路在通过两个装有不同液体的检测池时发生偏转，偏转的大小与两种液体之间折光率的差异成比例。光路的偏转由光敏元件上的位移测得，显示了折光率的不同。
在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器更加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检测池、狭缝2、准和零位玻璃调节器后在光敏元件上显示出狭缝1的影象 光敏元件上有两个并排的光敏接收元件。当检测池中的样品和参比的折光率变化时，光敏元件上的影象水平移动。光敏接收元件各自发出的电信号的变化与影象的位例。因此，与折射率的差异相对应的信号可由两信号输出的差异获得。

流路
流路的设计确保了只需按键就可完成参比溶液的替换工作。当冲洗键（电磁阀）处于ON的位置时，NC打开而NO关闭，由参比池从样品池流入废液瓶。当冲洗键处于OFF的位置时，NC关闭而NO打开，流动相则接由样品池流入废液瓶。

电路
电路系统包括各种电路，比如，信号处理电路，光控电路，温控电路和流量转换控制电路，图4-5即电路系统的示  两个光敏接收元件 ’)产生与入射光 ’)转换成电压信号，两个电压信号的差异可由求差电路获得。异与样品池中流动相的折光率的差异相对应。当经过噪音衰减，零点校正和
信号正负转换后，信号输出至积分输出仪(13)。这些功能分别由成：响应转换电路(7)，自动回零电路(8)和信回零电路(8)输出的信号，当经过范围选择、信号正负转换、结果累也可输入至记录仪。这些功能分别由下述电路完成：范围选择电路(9号正负转换电路(10)和结果累计计电路(4)则获得光量信号，光量控制电路(5)控制灯的号与现有的光量阀相匹配。即使在检测池被污染或灯的亮度降低的情况下，这种机理仍能使检测器的灵敏度稳定。温控电路通过开关电热器控制光学系统的温度，使从温度感应器输出的信号与当前温度℃一致。流路转换电路根据输入驱使三通电磁阀转换流路，它在测定电压后以测定的电压的一半调节阀的电压。

示差检测器主要是依据不同溶液的折光率来鉴定的，当浓度不一样折光率就发生变化，

①紫外检测器与示差检测器原理是什么？
紫外检测器:基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。
很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力，因此UV-VIS检测器既有较高的灵敏度，也有很广泛的应用范围。由于UV-VIS对环境温度、流速、流动相组成等的变化不是很敏感，所以还能用于梯度淋洗。一般的液相色谱仪都配置有UV-VIS检测器。
用UV-VIS检测时，为了得到高的灵敏度，常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长，但为了选择性或其它目的也可适当牺牲灵敏度而选择吸收稍弱的波长，另外，应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相。
示差检测器:对于偏转式示差折光检测器，光路在通过两个装有不同液体的检测池时发生偏转，偏转的大小与两种液体之间折光率的差异成比例。光路的偏转由光敏元件上的位移测得，显示了折光率的不同。 在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器更加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检......
在光学系统中采用了多种精密装置，提高了运行的稳定性，也使检测器加精致。从钨灯发射出的光束经过聚光透镜，狭缝1，准直镜和狭缝2检测池，然后光被检测池后的反光镜反射，再通过检测池、狭缝2、准和零位玻璃调节器后在光敏元件上显示出狭缝1的影象 光敏元件上有两个并排的光敏接收元件。
当检测池中的样品和参比的折光率变化时，光敏元件上的影象水平移动。光敏接收元件各自发出的电信号的变化与影象的位例。因此，与折射率的差异相对应的信号可由两信号输出的差异获得。

②各自的用途？
紫外检测器适用于有机分子具紫外或可见光吸收基团，有较强的紫外或可见光吸收能力的物质检测.
示差检测器属于通用性检测器，可以分析绝大多数的物质.

③它们有什么各自优点？
紫外检测器有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱.
示差检测器几乎对所有溶质都有响应.
④它们之间的区别？
示差检测在原理上虽然是通用型检测器，但是它的灵敏度低，和梯度脱洗不相容，因此它对于HPLC来说不是理想的检测器。
而紫外检测器既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱.