主题：【第二届网络大赛参赛作品】···重磅出击，再谈“基质效应”··讨论升级，欢迎参与···

原文由 dickwang2008 发表:

原文由 juju11 发表:
楼主写的很详细了，请问从楼主目前从事的工作来说，经常会建立新的分析方法并进行方法学的考查，请问楼主目前是以什么样的标准来考查基质效应的，目前SFDA对基质效应并没有特别明确的规定，是按照FDA的标准呢还是别的？
现在很多国外方法学的文献中一般都是采用至少高、中、低三个浓度，考查至少5份不同来源的基质的基质效应。个人认为只要不同浓度、不同基质来源的基质效应相差不大，方法就可以接受，至少这样，基质的影响是平行的，无论是什么浓度、什么来源。至于基质效应是否一定要小于20%,个人觉得只要能满足灵敏度要求就可以了。

首先感谢juju11的交流。

我们考察基质效应主要是测定六个不同个体的空白生物基质样品，加入LLOQ浓度的待测物，处理进样分析，同空白生物基质处理后的样品来比较，只要在空白生物基质中在待测物出峰处的响应低于LLOQ的20%，就认为是符合要求的。

juju提到方法只要满足灵敏度即可，其实不然，是因为在灵敏度满足的条件下，必须保证标准曲线满足要求，质控样品满足要求。但如果基质效应较大，那么很容易导致标准曲线的线性不好，或者质控样品不合格。所以有必要降低基质效应对方法的影响。

不知juju对此有何看法？谢谢交流。

原文由 juju11 发表:

原文由 dickwang2008 发表:

原文由 juju11 发表:
楼主写的很详细了，请问从楼主目前从事的工作来说，经常会建立新的分析方法并进行方法学的考查，请问楼主目前是以什么样的标准来考查基质效应的，目前SFDA对基质效应并没有特别明确的规定，是按照FDA的标准呢还是别的？
现在很多国外方法学的文献中一般都是采用至少高、中、低三个浓度，考查至少5份不同来源的基质的基质效应。个人认为只要不同浓度、不同基质来源的基质效应相差不大，方法就可以接受，至少这样，基质的影响是平行的，无论是什么浓度、什么来源。至于基质效应是否一定要小于20%,个人觉得只要能满足灵敏度要求就可以了。

首先感谢juju11的交流。

我们考察基质效应主要是测定六个不同个体的空白生物基质样品，加入LLOQ浓度的待测物，处理进样分析，同空白生物基质处理后的样品来比较，只要在空白生物基质中在待测物出峰处的响应低于LLOQ的20%，就认为是符合要求的。

juju提到方法只要满足灵敏度即可，其实不然，是因为在灵敏度满足的条件下，必须保证标准曲线满足要求，质控样品满足要求。但如果基质效应较大，那么很容易导致标准曲线的线性不好，或者质控样品不合格。所以有必要降低基质效应对方法的影响。

不知juju对此有何看法？谢谢交流。

呵呵，可能我写的不是很清楚，我的前提是做高、中、低三个不同的浓度，至少5份不同的来源的基质，这样做出来的不同浓度、不同来源的基质效应如果差不多，线性是不会不好的，因为各浓度的基质效应影响是相同的。但是如果只做LLOQ附近，而不做其他的浓度，那么可能会存在不同浓度基质效应影响不同的情况，那么线性也有可能不好，从基质效应的本质来说，很有可能不同浓度的基质效应影响不同的哦。

原文由 wisdom0026 发表:
学习了，原来师兄还是在搞科研。

原文由 wisdom0026 发表:
FDA在生物样品分析方法确证中对基质效应的规定——凡是使用液质建立生物样品分析方法时，必须考察基质效应对化合物测定的影响。那意思就是APCI也要考察基质效应？

原文由 dickwang2008 发表:

原文由 zpf20031212 发表:
楼主的大作哦！非常感谢楼主的心得体会，写得很全面，有理论、有实践，我也受益匪浅。比如，“当基质的影响控制在LLOQ的20%以下，这个方法才能被接受”，这个是我之前没有注意到的。我之前认为只要回收率稳定，低一点也可以接受，即基质效应大一些也行，只要能满足足够的检出限和稳定的回收率。

“还可以通过改变内源性物质与待测物在色谱柱上的保留时间”。之前我也试过，但没试成功。尤其是液液萃取之后的尿液，如果浓缩倍数过高时，基质效应就非常明显。最近我再试下，跟楼主探讨！

有一问题，“这些内源性的物质由于极性较大，会同待测物离子竞相竞争液滴表面，从而导致待测物的离子化效率降低或增强，引起响应降低或增高，这就产生所谓的基质抑制或基质增强效应”。的确，基质效应经常遇到，我做生物样本时基质抑制较多，做农药样品时，增强效应居多。要是从离子化机制上解释，什么时候基质增强？什么时候基质抑制？

还有APCI源的基质效应较ESI源要小些，这是为什么？

感谢版主的肯定，其中还有很多不足之处，还望指正。。。

对于提出的基质效应什么时候增强，什么时候抑制，这个没有具体的理论来支撑，目前来说我们也只是通过具体的试验来论证。

但对于为什么APCI的基质效应要小于ESI的，这个是可以解释的。因为APCi是气相离子化，也就是溶液先汽化成气体分子，然后经过电晕放电针，使分子带电；而ESI是液相离子化，是在经过毛细管时，带电，然后汽化，就在汽化的过程中，电荷从内部往液滴表面移动，从而使离子带电。在这个过程中，内源性物质会跟离子竞争液滴表面，从而产生基质效应。。

欢迎继续讨论。。

原文由 bongyi 发表:
一直想请教楼主个问题，像分析那些蛋白结合率较高的物质，如果采用沉蛋白的方法处理样本，会不会有一定比例的待测物质随蛋白一起被沉淀，一般情况下比例会有多少，同一物质这个比例会比较稳定吗？

原文由 pharmacy_detect 发表:
确实，在药学DMPK研究中以及农药残留检测pesticide residue analysis都存在基质效应，而且这项必须考察，在方法建立及优化的时候。

对生物样品分析LC/MS测定中基质效应产生的机制、测定基质效应的方法、减小基质效应的措施等等，dickwang2008老师结合自己的经验作了很好的总结，在此学习一下，谢谢楼主的分享！

基质效应，在API-MS（ESI 、APCI & APPI）条件下，说白了，就是其他物质对待测物离子化效率的影响。基于此，要减少对待测物的干扰，则可以分别从样品前处理、色谱条件优化、质谱条件优化等三方面着手。

前处理，PPT，LLE, SPE这些大家都注意到了，质谱条件优化大家也比较重视。个人在这里补充强调一下色谱条件对减少基质效应干扰的贡献。考虑到液相色谱质谱匹配的问题，只能用挥发性的流动相添加剂或者缓冲液（地球人都知道，呵呵），这里可以考虑着重优化流动相的pH值或者离子强度，对基质、待测物的离子化效率的影响，以此降低基质效应。——充分利用“电解质效应”！！！

pesticide residue analysis中，近来兴起了回声峰技术（echo peak technique），在DMPK中倒是没有这么个说法。有兴趣的话，可以以echo-peak injection、Echo peak calibration、echo peak technique为关键词搜索相关文献看看。

专家，有机会跟你请教学习一下