主题:【求助】进样后不出峰??

浏览0 回复14 电梯直达
pengyan033
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2005年版中国药典中规定用梯度洗脱测三七药材中的含量.我在做此试验时,条件都按药典规定的设置完后,开始做的空白梯度挺好.当进第一针对照后出来的三个色谱峰也不错.可连续进第二针对照后,最后一个峰却没有在同样的保留时间内走出来.接着我又进第三针对照,可是还没有出峰.为什么会这样?究竟是什么原因呢?我设置的时长是75分钟.最后一个峰在65分钟左右出峰.请高手们多多指教.
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Alex0802
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只有最后一个峰没出来吗?前面两个峰都出来了啊?很奇怪哦!
以前我遇到过不出峰是因为柱的出液口管路有裂痕,样品就没进检测器!
有水有渝
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有对照品吗?有的话进一个对照品看看是否也是一样的结果
nnsss
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原文由 pengyan033(pengyan033) 发表:
2005年版中国药典中规定用梯度洗脱测三七药材中的含量.我在做此试验时,条件都按药典规定的设置完后,开始做的空白梯度挺好.当进第一针对照后出来的三个色谱峰也不错.可连续进第二针对照后,最后一个峰却没有在同样的保留时间内走出来.接着我又进第三针对照,可是还没有出峰.为什么会这样?究竟是什么原因呢?我设置的时长是75分钟.最后一个峰在65分钟左右出峰.请高手们多多指教.


梯度准吗,色谱柱平衡时间够吗(进样间隔)
pengyan033
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对照品出峰。可样品就走不出来。我怀疑是梯度没有平衡好,可是我设置了90分钟还是不出。间隔时间有20分钟左右。
哇咔咔
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如果对照品有,样品没有,考虑下工艺是否有问题.是否提取出来了,或者药材本身含量.
有水有渝
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对照品有,而样品没有,那就要从工艺和前处理上找一下原因。
西湖醉鱼
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wangjuan55
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你的意思是样品处理都按药典,第一针三个峰都出现了,后面最后一峰没有出现。有意思。我做过一个样品,是因为有一个成分不稳定,流动相选择不好,保留时间改变比较大,而且吸收发生改变,所以找了很久。建议查下相关文献,看下第三成分。新手,自己也不懂。
cunsou
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bright1016
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柱子冲洗的时间不够长,就是平衡时间。
样品的处理有问题。
查看检测器,进一针标准品。
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