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主题：【转帖】HPLC分析方法开发中流动相调整。

浏览0 回复26 电梯直达
东风恶
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发表于：2010/05/15 20:52:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
方法 1：  由强到弱：  一般先用 90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)
进行试验，  这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整
有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
方法 2  三倍规则  ：每减少 10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留
因子约增加 3 倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调
整的过程中，注意观察各个峰的分离情况。
方法 3  粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂 10%的改
变量调整为 5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情
况不再改变。
先 100%的有机溶剂，在降下来。因为有些分离 96%即可分离
http://www.westyx.com/bbs/read.php?tid=60504&fpage=13
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2010/5/15 21:42:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以前知道由强到弱，但不知道三倍规则，谢谢东风。
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chqiu111111
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2010/5/15 23:36:16 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
恩，不错，学习了，谢谢哈！看来就是高手啊！
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lxx5052
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2010/5/17 18:40:16 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看来以前没有遵循这个方法，能分离好就行，呵呵，这下知道规则了，非常感谢楼主！
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2010/5/17 22:40:10 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用UPLC时，感觉只有楼主所说的一半。
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yongw
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2010/5/18 8:49:19 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
东风讲的用到了3倍规则
但是应用更多的是刚开始时走个梯度，根据梯度结果计算等度条件
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yongw
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2010/5/18 8:50:41 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主应该讲的都是反相条件吧
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yongw
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2010/5/18 8:53:05 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用UPLC时，感觉只有楼主所说的一半。

没有过UPLC，问问快乐：UPLC一般分析样品基本上都是在10分钟以内出峰吗？流速都是低流速吗？柱子有多长？液相都是两元泵吗？
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2010/5/18 14:54:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yongw(yongw) 发表:
东风讲的用到了3倍规则
但是应用更多的是刚开始时走个梯度，根据梯度结果计算等度条件


是指刚开始摸条件时，都是利用梯度，最后才等度，是吗？
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快乐
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2010/5/18 14:55:24 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yongw(yongw) 发表:
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用UPLC时，感觉只有楼主所说的一半。

没有过UPLC，问问快乐：UPLC一般分析样品基本上都是在10分钟以内出峰吗？流速都是低流速吗？柱子有多长？液相都是两元泵吗？


基本上3min全出完了。
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yongw
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2010/5/18 15:16:51 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
原文由 yongw(yongw) 发表:
东风讲的用到了3倍规则
但是应用更多的是刚开始时走个梯度，根据梯度结果计算等度条件


是指刚开始摸条件时，都是利用梯度，最后才等度，是吗？

对，就是这个思路
走一针梯度，等度就知道给大概，然后再确定具体的等度比例
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