主题:【原创】调谐报告解读

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由于好多朋友,特别是入门的朋友关于调谐有着好多好多的问题,我将将我所学与大家分享,个人观点,由于知识有限,请大家拍砖,一起分享一起进步

首先调谐做什么?(摘自安捷伦培训资料)
1.设定离子源电压,以得到良好的灵敏度。2.设定amu gain和offset以得到正确的峰宽。3.设定mass gain和masoffset以保证正确的质量分配。4.设定EM电压

调谐的标样,也就是校正液,常用的是PFTBA,高质量数调谐液DFTPP
调谐报告的各个参数说明和合适的范围




我们一般有自动调谐,标准调谐,快速调谐,目标调谐和手动调谐
自动调谐:主要是是通过调谐找到仪器的最好灵敏度,即调整EM电压和峰宽达到最佳。使其有相近的峰宽,平滑对称的峰形,正确的质量分配,适当的EM电压,合适的丰度值,典型的相对丰度和合适的同位素比。

标准调谐:其实是为了定性,即调谐到最合适谱库建立的状态。它使其有对应的质量数峰宽,平滑对称的峰,正确的质量分配,合适的电子倍增器的电压,适当的丰度,合适的相对丰度,同位素比。

快速调谐:是对amu gain,offset,EM电压和质量轴校正。所有其他源参数不变。调谐69,209,502三个峰

目标调谐应该是针对EPA那个水质检测标准而言的吧,需要一些离子满足指定的丰度。(摘自iluvm)

手动调谐,其实我觉得这跟自动调谐差不多,等你达到适当的水平,跟距自己的条件改变相关参数,从而设置适合自己的调谐,从而合适自己的分析。这步我一直没做过,呵呵,能力有限。

通过调谐报告,我们常用的数据有
1.EM电压,一般超过2400就要清洗等等,这一步我建议2000一下,就该洗洗,有助于仪器的寿命也有助于你对仪器的学习。有网友提出经常洗易造成表面活化,而且这网友说的确实有理所以建议采纳之!

2.真空度是否足够,就是氮气,氧气的比例,水等等。这一步我们只要关注氮气小于5%,当然真空度好一般是小于2%甚至更小,这个自己掌握,越小越好,不管是从保护灯丝还是离子源等等。一般氮气下来,水峰还会高,这是因为水峰比较难抽,所以要抽两个小时以上。氮气一般40分钟即可抽到5%一下!

3.502的比例,这个一般是大于2%,我一般要求大于3%,这个参数是对你的高质量数定量影响关键重要。一般离子源脏会引起他偏小,所以好的仪器维护就可以给你更好的灵敏度和分析结果。

我一时也想不到那么多,主要我在家,没有调谐报告,如果有什么疑问,欢迎大家提出,我尽量解答,一起学习,一起分享,一起进步。这个版面的高手好多,只要大家都积极参与,我相信没有解决不了的问题!

请大家积极提问并分享你们的经验和知识,谢谢,我将选择好的问题和回答,将一块统计上来,希望斑竹能给提问和解答者积分奖励,如有错误请指出指导,谢谢合作

问题1:增益调谐和自动调谐有什么区别?最近我有一台仪器的响应值下降得很厉害,我想试试增益调谐看看。


回答:自动增益调谐这种调谐或称为高灵敏度调谐。执行增益标准调谐可创建以下两个文件:Atune.U HiSense.UAtune.U 是标准的自动调谐文件,只是它将 EMV 设置为获取增益 105。已创建的另一个调谐文件 HiSense.U,将 EMV 设置为获取增益 15 x 105。会生成二个调谐文件。你不用U那个可以选回自动调谐那个。一般来说相当于自动调谐EMV+400V。资料上说有利于保持同实验仪器的一致性。

灵敏度(或响应值)下降,EMV电压不高,看看衬管和进样口是否干净,真空质量好不好(有无微漏及气体是否纯净),注射器是否良好状态等。

80后的牛分享:EI源电压过大,对低质量端离子影响大,电压过小时,则对高质量端离子影响大;amu gain和amu offset都控制质量峰的峰宽,且高增益值和高补偿值都产生窄的峰宽,不同的是,amu gain(斜率)对高质量数峰宽影响比对低质量数峰宽影响要大,而amu offset(截距)对整个质量范围的峰宽影响相同。好的调谐结果是,每个峰的半峰宽范围在0.55±0.10之内,而且尽可能一致。Mass gain对高质量端影响大,mass offset同时影响整个质量轴。
4、自动调谐又称最大灵敏度调谐,而标准谱库调谐后,会获得与标准谱库最一致的条件;快速调谐是在自动调谐的基础上进行的,它设置四级杆的参数,但不调节离子源。
5、自动调谐报告解析:①轮廓图:平滑对称的峰形,502峰谷要低于同位素503峰高的一半,即502峰和503峰要完全分离。②相近的峰宽:半峰宽在0.55±0.10之内,而且尽可能一致。③质谱图中峰的个数为100多个,若达到200-300个,则说明离子源脏了。④69离子为基峰,其绝对丰度为20-50万,对于相对丰度,要求m/z219的丰度>m/z69丰度的40%,没有上限限制,m/z502的丰度>m/z69丰度的2%。⑤质量分配:±0.2;⑥水相对于69的比例应不大于20%,氮气相对于69的比例不大于10%。⑦同位素丰度比:m/z70:m/z69 0.5-1.6%;m/z220:m/z219 3.2-5.4%;m/z503:m/z502 8-12%。
  标准调谐报告解析:不同之处:①:半峰宽范围为0.5±0.10。②:m/z219丰度为m/z69丰度的40%-80%,m/z502丰度为m/z69丰度的2%-5%。

问题二:轮廓图:平滑对称的峰形,502峰谷要低于同位素503峰高的一半,即502峰和503峰要完全分离。难以理解。
回答:应该是502503中间的峰谷要低过503峰高的一半。这样就可以理解为重叠的部分尽可能的少,从而才能达到要求,其实这点我们也可以从我们的调谐图上看出来。



问题三:请问如果502或其他离子的同位素峰型不好,不光滑,可能分叉,是什么原因呢?

回答:离子源的各个组件脏都可能引起同位素峰分叉,还有真空抽的时间不够,也会引起分叉或峰型不好,校正液不够或变质等。

问题四:定量用什么调谐?定性用什么调谐?
回答:定量选择自动调谐,因为自动调谐是将仪器的灵敏度调到最好状态。定性选择标准调谐,标准调谐时是将仪器的状态调到跟普库形成的状态最接近。
该帖子作者被版主 symmacros6积分, 2经验,加分理由:欢迎调谐报告讨论话题。
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2011/5/27 15:59:55 Last edit by 3866625 举报
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疯子兄,我想请教一下增益调谐和自动调谐有什么区别?最近我有一台仪器的响应值下降得很厉害,我想试试增益调谐看看。
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疯子兄,我想请教一下增益调谐和自动调谐有什么区别?最近我有一台仪器的响应值下降得很厉害,我想试试增益调谐看看。


增益调谐?不好意思,我没听说过这种。响应值下降的很厉害,自动调谐如何?传上来看看
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疯子兄,我想请教一下增益调谐和自动调谐有什么区别?最近我有一台仪器的响应值下降得很厉害,我想试试增益调谐看看。


增益调谐?不好意思,我没听说过这种。响应值下降的很厉害,自动调谐如何?传上来看看


是不是指增益自动调谐 (Atune.U+HiSense.U)

执行增益标准调谐可创建以下两个文件:Atune.U 和 HiSense.U。Atune.U 是标准的自动调谐文件,只是它将 EMV 设置为获取增益 105。已创建的另一个调谐文件 HiSense.U,将 EMV 设置为获取增益 15 x 105
七宝
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嗯,是朱老师说的这种调谐,我以前遇到响应值下降都是清洗离子源,但是这次好像效果不是很明显,而且调谐电压也不高,只有大约1300左右。但是我以前测试的目标化合物的峰面积从100w下降到大约20w左右了。
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原文由 vargas1983(vargas1983) 发表:
嗯,是朱老师说的这种调谐,我以前遇到响应值下降都是清洗离子源,但是这次好像效果不是很明显,而且调谐电压也不高,只有大约1300左右。但是我以前测试的目标化合物的峰面积从100w下降到大约20w左右了。


这种调谐或称为高灵敏度调谐,我只是在测定灵敏度(信噪比)时用过,一般不用。

灵敏度(或响应值)下降,EMV电压不高,看看衬管和进样口是否干净,真空质量好不好(有无微漏及气体是否纯净),注射器是否良好状态等。
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讲得很好,但是对于初级选手如何选择调谐类别呢?
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讲得很好,但是对于初级选手如何选择调谐类别呢?


当然建议自动调谐了
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嗯,是朱老师说的这种调谐,我以前遇到响应值下降都是清洗离子源,但是这次好像效果不是很明显,而且调谐电压也不高,只有大约1300左右。但是我以前测试的目标化合物的峰面积从100w下降到大约20w左右了。

这个应该不是跟你的调谐有关,影响灵敏度的因素好多,你可以在信息网上搜一下。其实自动调谐就是将你的灵敏度调到最大了。
原天
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自动增益调谐。会生成二个调谐文件。你不用U那个可以选回自动调谐那个。如同版主说的那样。一般来说相当于自动调谐EMV+400V。资料上说有利于保持同实验仪器的一致性。
原天
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EI源电压过大,对低质量端离子影响大,电压过小时,则对高质量端离子影响大;amu gain和amu offset都控制质量峰的峰宽,且高增益值和高补偿值都产生窄的峰宽,不同的是,amu gain(斜率)对高质量数峰宽影响比对低质量数峰宽影响要大,而amu offset(截距)对整个质量范围的峰宽影响相同。好的调谐结果是,每个峰的半峰宽范围在0.55±0.10之内,而且尽可能一致。Mass gain对高质量端影响大,mass offset同时影响整个质量轴。
4、自动调谐又称最大灵敏度调谐,而标准谱库调谐后,会获得与标准谱库最一致的条件;快速调谐是在自动调谐的基础上进行的,它设置四级杆的参数,但不调节离子源。
5、自动调谐报告解析:①轮廓图:平滑对称的峰形,502峰谷要低于同位素503峰高的一半,即502峰和503峰要完全分离。②相近的峰宽:半峰宽在0.55±0.10之内,而且尽可能一致。③质谱图中峰的个数为100多个,若达到200-300个,则说明离子源脏了。④69离子为基峰,其绝对丰度为20-50万,对于相对丰度,要求m/z219的丰度>m/z69丰度的40%,没有上限限制,m/z502的丰度>m/z69丰度的2%。⑤质量分配:±0.2;⑥水相对于69的比例应不大于20%,氮气相对于69的比例不大于10%。⑦同位素丰度比:m/z70:m/z69 0.5-1.6%;m/z220:m/z219 3.2-5.4%;m/z503:m/z502 8-12%。
  标准调谐报告解析:不同之处:①:半峰宽范围为0.5±0.10。②:m/z219丰度为m/z69丰度的40%-80%,m/z502丰度为m/z69丰度的2%-5%。
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