实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8040239今日发帖：33 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
厂商论坛
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【原创】【极限体验】一次可怕的耐用性试验(12月份)

浏览0 回复28 电梯直达
东风恶
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2011/12/31 21:13:25 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被luxw设置为精华；
终于放假了！
由于现在药品质量研究中要求更多了，如色谱条件的耐用性等。试验多了，资料也难整理了。。。
色谱柱：SN:W10212097，PN:Wel518415
        SN:W11212203，PN:Wel518415，LN:W1811.02
 
色谱条件：
取装量差异项下的内容物适量，精密称定，用磷酸盐缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇-乙腈（550:200:250）溶液溶解并稀释制成每1ml中约含阿莫西林2mg/ml的溶液，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml置100ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液溶液稀释至刻度，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录V  D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.1mol/L磷酸二氢钾溶液-0.018mol/L十二烷基硫酸钠-甲醇-乙腈（275:275:200:250），用磷酸调节pH值至2.0；流动相B为乙腈；流速为每分钟1.0ml；检测波长为225nm。以下表进行线性梯度洗脱。理论板数按阿莫西林峰计算不低于3000。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%～25%。再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液阿莫西林主峰面积（1.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液阿莫西林主峰面积的3倍（3.0%）。（供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计）。

时间（分钟）

流动相A（%）

流动相B（%）

0

95

5

5

90

10

15

70

30

20

70

30

25

95

5

35

95

5

耐用性试验结果汇总


耐用性研究项目

试验方法的条件

确认的耐用性范围


流动相

流动相B（含水情况）

比例为95:5（乙腈-水）

应控制水分


流动相A组分pH值变化

pH值：1.8、2.0、2.2

±0.2


流动相A磷酸盐浓度

0.095～0.105mol/L

0.10±0.005mol/L


流动相A SDS浓度

0.0171～0.0189mol/L

0.018±0.009mol/L


流动相A组分比例

每个组分±5%变化

每个组分±5%变化


流速（活性成分的保留时间变化）

0.95～1.20ml/min

1.0±0.05ml/min


色谱柱温度

室温

无相关研究


检测波长

225nm

220nm～225nm


（1）检测波长变化±5nm，试验结果见下图表。

试验结果色谱图（225nm±5nm）

225±5nm有关物质检查结果

波长（nm）

峰面积归一化法（%）

阿莫西林峰面积

双氯西林钠峰面积

225nm

98.346

2973049

2070214

220nm

98.063

2954675

2323686

230nm

98.854

2963646

1360435

试验结果表明，检测波长波动对双氯西林钠的检测响应值有较大影响，在220nm～225nm之间波动，影响较小；阿莫西林检测响应值影响较小。
备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（225nm）、样品1（220nm）、样品2（230nm）。



（2）流速变化，试验结果见下图表。

流速变化试验结果色谱图

备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（1.0ml/min）、样品3（0.95ml/min）、样品4（1.05ml/min）、样品5（流速1.25ml/min）。

流速变化试验结果

流速（ml/min）

两成分主峰分离度

1.0

3.939/5.797

0.95

3.963/5.550

1.05

3.897/5.597

1.25

3.617/3.627


试验结果表明，流速波动对两组份主峰分离度无影响，均大于1.5；流速增加应考虑溶剂峰的影响。



（3）流动相B比例变化，试验结果见下图表。

流动相B比例变化试验结果色谱图



备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品、样品6（流动相B：乙腈-水）

流动相B比例变化试验结果

流动相B

两组份主峰分离度

理论板数

乙腈：水（100:0）

3.939/5.797

2388/10265

乙腈：水（95:5）

5.700/3.399

2736/5736



试验结果表明，流动相B与水比例变化对双氯西林钠的检测响应值有较大影响，在配制流动相B时应控制水分。

（4）流动相B组分pH值变化，试验结果见下图表。

流动相组分比例变化试验结果色谱图





备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（pH值2.0）、样品7（pH值1.8）、样品8（pH值2.2）。

流动相B组分pH值变化试验结果

pH值

两组份主峰分离度



                2.0               

3.939/5.797

1.8

3.752/3.616

2.2

4.979/2.282



试验结果表明，pH值变化±0.2，两组份主峰分离度无影响。


（5）流动相组分A磷酸盐浓度变化，试验结果见下图表。

流动相组分A磷酸盐浓度变化试验结果色谱图

备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（0.1mol/L磷酸二氢钾溶液）、样品9（0.095mol/L磷酸二氢钾溶液）、样品10（0.105mol/L磷酸二氢钾溶液）。

流动相组分A磷酸盐浓度变化试验结果

磷酸二氢钾浓度（mol/L）

两组份主峰分离度

0.1

3.939/5.797

0.095

5.948/2.412

0.105

4.510/2.970



试验结果表明，流动相组分A磷酸盐浓度变化±0.05，两组份主峰分离度无影响。


（6）流动相组分A十二烷基硫酸钠浓度变化，试验结果见下图表。

十二烷基硫酸钠浓度变化试验结果色谱图

备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（0.018mol/L）、样品11（0.0171mol/L）、样品12（0.0189mol/L）。

十二烷基硫酸钠（SDS）变化试验结果

十二烷基硫酸钠浓度（mol/L）

两组份主峰分离度

0.018

3.939/5.797

0.0171

4.941/6.185

0.0189

4.731/6.587



试验结果表明，流动相组分A十二烷基硫酸钠浓度变化±0.009，两组份主峰分离度无影响。


（7）流动相B组分比例变化，试验结果见下图表。

流动相B主峰比例变化试验结果色谱图



备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品、样品13～20。

流动相B组分比例变化试验结果

样品序号

KH2PO4：SDS：甲醇：乙腈

两组份主峰分离度

13

262:275:200:250

4.115/6418

14

289:275:200:250

4.253/3.332

15

275:262:200:250

4.127/6.618

16

275:289:200:250

4.424/6.476

17

275:275:190:250

4.795/4.778

18

275:275:210:250

4.312/5.960

19

275:275:200:238

4.920/1.598

20

275:275:200:262

4.652/5.468

为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 万能试验机 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
tangtang
tangtang
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/12/31 21:16:19 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
想看看如何可怕法。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
东风恶
YJYQXCYS
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/12/31 21:46:48 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 tangtang(tangtang) 发表:
想看看如何可怕法。

谢谢您的关注！
祝您新年快乐！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
tangtang
tangtang
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/12/31 21:50:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
原文由 tangtang(tangtang) 发表:
想看看如何可怕法。

谢谢您的关注！
祝您新年快乐！


2011年最后一天了，您还在辛苦发原创，佩服啊。

原来可怕是说所有的影响因素都要研究啊。

药典规定允许一定范围的调整，这个范围也要用数据来证明吗？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
东风恶
YJYQXCYS
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2011/12/31 22:07:52 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是的，还有选用三家以上主流品牌的色谱柱进行。很多试验的，我没有写完。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
冷冷的冰雨
xy4585618
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/1 15:08:02 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
2011最后一篇啊
作品内容很给了
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
fengmo4668
fengmo4668
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/1 16:23:36 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
（2）流速变化，试验结果见下图表。



备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（1.0ml/min）、样品3（0.95ml/min）、样品4（1.05ml/min）、样品5（流速1.25ml/min）。


你的的流速变化试验中，
流速调大，保留时间缩短可以理解，
可是，你把流速调整到0.95ml/min，保留时间也缩短了怎么解释呢？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2012/1/1 16:25:31 Last edit by fengmo4668
东风恶
YJYQXCYS
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/1 19:20:29 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
（2）流速变化，试验结果见下图表。



备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（1.0ml/min）、样品3（0.95ml/min）、样品4（1.05ml/min）、样品5（流速1.25ml/min）。


你的的流速变化试验中，
流速调大，保留时间缩短可以理解，
可是，你把流速调整到0.95ml/min，保留时间也缩短了怎么解释呢？

从上至下，基本上没有多大变化的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
fengmo4668
fengmo4668
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/2 12:47:44 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
（2）流速变化，试验结果见下图表。



备注：色谱图从上至下顺序分别为：样品（1.0ml/min）、样品3（0.95ml/min）、样品4（1.05ml/min）、样品5（流速1.25ml/min）。


你的的流速变化试验中，
流速调大，保留时间缩短可以理解，
可是，你把流速调整到0.95ml/min，保留时间也缩短了怎么解释呢？

从上至下，基本上没有多大变化的。


你的意思，解释成液相系统的正常波动？？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
wxs123456
wxs123456
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/4 15:36:50 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于液相，本人是初学者，能从中学到很多东西，谢谢！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
liufengbuji
liufengbuji
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/4 21:38:24 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
路过，学到很多东西
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【极限体验】一次可怕的耐用性试验(12月份)
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁