主题:【讨论】样品和标准品使用不同的溶剂对分析结果有影响吗?

浏览0 回复12 电梯直达
xuanleer
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液相分析时,样品和标准品使用的溶剂不同,对测试结果影响大么?想听听大家的声音啊~~
用C18色谱柱,乙腈和水作为流动相,梯度洗脱,目标物质是一种多肽。如果样品是溶解在乙腈和水的混合液中,而标准品是溶解在PBS(磷酸缓冲液 Phosphate Buffer Solution),这样会对通过标准曲线算出的样品中多肽含量有影响吗?
其实,问题的关键就是溶剂不同,由于没做实验去验证,所以未果。。。专家的进来吆~~学习学习~~
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液相分析时,样品和标准品使用的溶剂不同,对测试结果肯定会有影响,每次用的时候都是用同一样试剂做,这样误差小些。
=牛牛=
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happy爱米粒
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为了避免溶剂效应,最好是前后一致,也可以将样品溶解在不同溶剂里做响应值比对啊
happy爱米粒
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这种情况,在液相影响可能影响保留行为,在质谱差异就大了去了,直接影响定量。
zhw19811005
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wsy18
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原文由 木有才(xgy2005) 发表:
为了避免溶剂效应,最好是前后一致,也可以将样品溶解在不同溶剂里做响应值比对啊
同意木老师的意见。用同种溶剂可以避免所有麻烦,没必要用不同溶剂的。讨论一下可以,去做没有价值。
xuanleer
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原文由 木有才(xgy2005) 发表:
这种情况,在液相影响可能影响保留行为,在质谱差异就大了去了,直接影响定量。


才老师可否分享下,为什么上质谱差异会那么大。小xuan经验不足,还请细讲,也想叫其他的液相入门贴友可以获得更多的经验。
happy爱米粒
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原文由 xuanleer(xuanleer) 发表:
原文由 木有才(xgy2005) 发表:
这种情况,在液相影响可能影响保留行为,在质谱差异就大了去了,直接影响定量。


才老师可否分享下,为什么上质谱差异会那么大。小xuan经验不足,还请细讲,也想叫其他的液相入门贴友可以获得更多的经验。


呵呵,俺也不是很懂,个人认为,溶解溶剂PH会改变化合物存在形态,倾向于离子型态存在的在液相反相色谱柱上保留性就差一些,出峰会提前,在质谱上则离子化效率高,灵敏度会高很多;分子态则保留性强,质谱灵敏度差一些
xuanleer
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原文由 yonglinxu(yonglinxu) 发表:
这个做个空白试验即只有溶剂是不是能看出来


这是个好方法,可以尝试下,有时候因为实验需要,会碰到溶剂不一样的情况。
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