主题：【讨论】做中药前处理的问题，大家讨论

原文由 zjzy(zjzy) 发表:
最近要做一个中药中的某个成分，是要过C18的柱子，最后是液相检测，甲醇水的溶剂系统，由于要定量测定，因此最后的洗脱液需要定容，在这里有个疑问：

  假设最后洗脱是采用2ml甲醇洗脱，那么我们应该怎么洗脱会比较好一点：

    1、精确量取2ml甲醇，直接洗脱，收集洗脱液进样；
    2、量取适量甲醇（约2ml）洗脱，水浴挥干，甲醇（或流动相）溶解并定容至2ml；
    3、量取1.5ml甲醇洗脱柱子（前提是1.5ml足够把目标物洗脱下来）直接在容量瓶定容至2ml；

不知道大家认为那种做法好一点？为什么

原文由 雾非雾(mcds) 发表:

原文由 zjzy(zjzy) 发表:
最近要做一个中药中的某个成分，是要过C18的柱子，最后是液相检测，甲醇水的溶剂系统，由于要定量测定，因此最后的洗脱液需要定容，在这里有个疑问：

  假设最后洗脱是采用2ml甲醇洗脱，那么我们应该怎么洗脱会比较好一点：

    1、精确量取2ml甲醇，直接洗脱，收集洗脱液进样；
    2、量取适量甲醇（约2ml）洗脱，水浴挥干，甲醇（或流动相）溶解并定容至2ml；
    3、量取1.5ml甲醇洗脱柱子（前提是1.5ml足够把目标物洗脱下来）直接在容量瓶定容至2ml；

不知道大家认为那种做法好一点？为什么

理论上来说6ml的SPE柱洗脱液体积要在15-20ml左右比较合适，洗脱液太少可能达不到把目标物完全洗脱的效果。洗脱后可以再浓缩，然后再定容。

原文由 zjzy(zjzy) 发表:
最近要做一个中药中的某个成分，是要过C18的柱子，最后是液相检测，甲醇水的溶剂系统，由于要定量测定，因此最后的洗脱液需要定容，在这里有个疑问：

  假设最后洗脱是采用2ml甲醇洗脱，那么我们应该怎么洗脱会比较好一点：

    1、精确量取2ml甲醇，直接洗脱，收集洗脱液进样；
    2、量取适量甲醇（约2ml）洗脱，水浴挥干，甲醇（或流动相）溶解并定容至2ml；
    3、量取1.5ml甲醇洗脱柱子（前提是1.5ml足够把目标物洗脱下来）直接在容量瓶定容至2ml；

不知道大家认为那种做法好一点？为什么

原文由 xiongbb(xiongbb) 发表:

原文由 zjzy(zjzy) 发表:
最近要做一个中药中的某个成分，是要过C18的柱子，最后是液相检测，甲醇水的溶剂系统，由于要定量测定，因此最后的洗脱液需要定容，在这里有个疑问：

  假设最后洗脱是采用2ml甲醇洗脱，那么我们应该怎么洗脱会比较好一点：

    1、精确量取2ml甲醇，直接洗脱，收集洗脱液进样；
    2、量取适量甲醇（约2ml）洗脱，水浴挥干，甲醇（或流动相）溶解并定容至2ml；
    3、量取1.5ml甲醇洗脱柱子（前提是1.5ml足够把目标物洗脱下来）直接在容量瓶定容至2ml；

不知道大家认为那种做法好一点？为什么

第二种，首先进样，你样品就是甲醇体系，你hplc体系下的流动相是什么？对吧。容易导致峰前沿
             

原文由 zjzy(zjzy) 发表:

原文由 xiongbb(xiongbb) 发表:

原文由 zjzy(zjzy) 发表:
最近要做一个中药中的某个成分，是要过C18的柱子，最后是液相检测，甲醇水的溶剂系统，由于要定量测定，因此最后的洗脱液需要定容，在这里有个疑问：

  假设最后洗脱是采用2ml甲醇洗脱，那么我们应该怎么洗脱会比较好一点：

    1、精确量取2ml甲醇，直接洗脱，收集洗脱液进样；
    2、量取适量甲醇（约2ml）洗脱，水浴挥干，甲醇（或流动相）溶解并定容至2ml；
    3、量取1.5ml甲醇洗脱柱子（前提是1.5ml足够把目标物洗脱下来）直接在容量瓶定容至2ml；

不知道大家认为那种做法好一点？为什么

第二种，首先进样，你样品就是甲醇体系，你hplc体系下的流动相是什么？对吧。容易导致峰前沿
             

假设你的洗脱溶液不影响峰型，是不是可以采用第一种或者第三种方法？我有种感觉是，重新挥干，复溶可能会有损失呢？