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液质联用（LCMS）

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主题：【已应助】用hilic柱分离三羧酸循环代谢物和氨基酸

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junzilan84

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发表于：2012/03/11 11:50:47 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

刚开始用液质，很多东西都还不懂，有个项目要测三羧酸循环代谢物和几个氨基酸

文献上用的是氨基柱，流动相是20mM醋酸铵+20mM 氨水 (pH9.45)，乙腈

实验室只有普通的BEH Hilic （pH 2-8），流动相用10mM醋酸铵（没有调ph）、乙腈试了一下，发现保留不太好，峰形也很难看，而且负离子模式下MRM扫描响应很差

仪器是agilent 6430 QQQ

大家帮忙分析下，针对这几个问题有没有什么建议？

1. 要测的化合物分子量小，干扰多，负离子模式下响应很低

2. BEH hilic 柱好像比较适合碱性化合物的分离，有没有可能分离小分子有机酸？

3. 峰形难看，有几个化合物出来的峰就是一个大包

4. 实在不行就换去气质了.....>_<

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2012/3/11 13:06:39 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我做过用HILIC柱子测定氨基酸，采用的条件是5mM的醋酸铵含0.1%的甲酸和乙腈，在正离子模式下的MRM检测，不同的通道测，响应还可以，苯丙氨酸信号比较强，丙氨酸稍微弱些。

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kylabs

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2012/3/11 17:58:59 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

上传一个PNAS上面做三羧酸循环相关要测的几种代谢物LCMS方法。

用的是Cogent Diamond Hydride亲水柱，各种亲水柱之间的差异还是很大的。

附件：

Gluconeogenic carbon flow of tricarboxylic acid cycle.pdf

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peterhello

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2012/3/12 10:15:17 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 junzilan84(junzilan84) 发表:
刚开始用液质，很多东西都还不懂，有个项目要测三羧酸循环代谢物和几个氨基酸

文献上用的是氨基柱，流动相是20mM醋酸铵+20mM 氨水 (pH9.45)，乙腈

实验室只有普通的BEH Hilic （pH 2-8），流动相用10mM醋酸铵（没有调ph）、乙腈试了一下，发现保留不太好，峰形也很难看，而且负离子模式下MRM扫描响应很差

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大家帮忙分析下，针对这几个问题有没有什么建议？

1. 要测的化合物分子量小，干扰多，负离子模式下响应很低

2. BEH hilic 柱好像比较适合碱性化合物的分离，有没有可能分离小分子有机酸？

3. 峰形难看，有几个化合物出来的峰就是一个大包

4. 实在不行就换去气质了.....>_<