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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】你认为正、反相色谱分离的原理是什么？

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有水有渝
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发表于：2012/04/15 18:56:55 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊




你认为正、反相色谱分离的原理是什么，吸附、分配还是兼而有之，你是否根据分离原理设计开发过液相色谱分析方法，很多培训资料，教科书中的方法开发介绍时几乎没有从分离机制方面入手的，分离机制在方法开发中是否无用处呢？
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xiaowang268
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2012/4/17 17:15:56 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
大极性先出的就是反相，小极性先出的就是正相
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有水有渝
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2012/8/25 10:47:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
大极性先出的就是反相，小极性先出的就是正相


这个只是提到了一种如何鉴别是正、反相柱的方法，未涉及分离机理。
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xiaowang268
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2012/8/25 11:01:31 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
大极性先出的就是反相，小极性先出的就是正相


这个只是提到了一种如何鉴别是正、反相柱的方法，未涉及分离机理。

那怎么鉴别呢？
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有水有渝
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2012/8/25 11:23:50 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
大极性先出的就是反相，小极性先出的就是正相


这个只是提到了一种如何鉴别是正、反相柱的方法，未涉及分离机理。

那怎么鉴别呢？


xiaowang268版可能误会我的意思了，我是认可你的鉴别方法的，只是说你没有回答主题中的主要问题。
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xiaowang268
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2012/8/25 13:18:11 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正、反相色谱分离的原理是吸附、分配兼而有之吧
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清风
dengkk
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2012/9/2 11:09:11 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
硅胶柱和氧化铝柱的主要分离原理是吸附作用吧，
氨基柱和氰基柱还是分配作用占主要，而且NH2上的氢对电负性基团具有较强的氢键力，保留作用明显
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pandora98
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2012/9/3 11:17:50 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
大极性先出的就是反相，小极性先出的就是正相

错，亲水色谱就是小极性先出来。
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pandora98
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2012/9/3 11:34:41 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:




你认为正、反相色谱分离的原理是什么，吸附、分配还是兼而有之，你是否根据分离原理设计开发过液相色谱分析方法，很多培训资料，教科书中的方法开发介绍时几乎没有从分离机制方面入手的，分离机制在方法开发中是否无用处呢？


早期的正相柱主要是硅胶填料，人们的理解是样品在硅胶上的吸附和解离能力不一致
而反相柱在硅胶颗粒表面键合了诸如十八烷基碳链等极性很小的基团，样品极性和空间结构的差异而导致的在固定相上的保留能力不同，即所谓的分配系数不同，不同样品保留时间不一样。
后来也有CN基柱和石墨柱，既可反相也可以正相
还有亲水色谱柱，流动相要从大比例有机相开始，逐渐降低至大比例水相，跟反相色谱流动相种类一致，但梯度正相反。
所谓吸附、分配，总的来说，都可以理解为相似相溶，相溶则保留能力强，反之则弱
这些理论上的东西都是人们试图去解释色谱分离机制不同时期提出的不同理论，真正实际应用过程主要还是靠经验，最主要还是记住相似相溶一点即可。
该帖子作者被版主 xky0230699加 2积分， 2经验，加分理由：感谢分享
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2012/9/3 16:19:25 Last edit by xky0230699
michaelye2012
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2012/9/7 20:42:43 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正相：固定相的极性强于流动相，分析物质按极性大小，依次出峰，一般极性小的先出峰；
反相：固定相的极性小于流动相，一般固定相为c18或C8，分析物质按疏水性依次出峰，一般亲水性的物质先出峰；
当前开发的亲和色谱柱，与传统C18相比，碳链数目相对少些，多了些亲水基团，故对一些极性物质的保留左右增强，出峰顺序与传统ods相比有部分颠倒。
总之，分析物质在固定相与流动相之间的作用，如同挖墙脚，流动相就是挖墙脚的，必须投其所爱好，才能将其依次洗脱
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