快速导航采购仪器提醒

厂商论坛

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 特色服务 > 厂商论坛帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

主题：【第六届原创】液相管路里混入不互溶试剂的不寻常经历

浏览0 回复74 电梯直达

fengmo4668

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2012/10/25 15:40:53 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

该帖子已被samanthalas设置为精华；

维权声明：本文为fengmo4668原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。

话说这是十一节前的事儿了。因为临近节前，大家都在设计8天假期的时间安排，所以于工作上有所懈怠，或者说叫做不专心吧，因而发生的一起操作失误。

事情是这样的：
我做维生素A的检测。用的是正相色谱系统。接触过正相系统的朋友可能会比较有体会，正相的保留时间稳定太难了。往往要3,4个小时才能达到比较好的稳定。

我的情况就是这样，辛辛苦苦4个多小时才把保留时间的稳定性搞好。

然后编好进样程序，点击“开始”按钮。

在点击“开始”按钮后的一瞬间，我感觉我进样程序的方法不对，一确认，果然是错了。本来流动相应该是用A、C通道的，结果走成了别的通道（是做另一个检验项目用的色普级甲醇）。

操作完之后就发现错误，到确认错误，应该就是2秒左右的光景。停泵命令发出后，延迟了几秒停止，感觉加到一起总共就是5秒的光景。想着1ml/min的流速，5秒也就混进去0.1ml的甲醇而已。虽然说甲醇和异辛烷以及二氯甲烷不互溶，但是不互溶归不互溶，多多少少还应该有一定的溶解性的。不接色谱柱冲洗一会，应该就会冲洗出来的(不接色谱柱是怕把甲醇保留在色谱柱中，更麻烦)。于是，断开色谱柱，用做样的流动相冲洗管路，想尽快的把甲醇冲洗出来。

然而冲洗了20多min后再接上色谱柱，却沮丧的发现对照的保留时间提前了！！！

又试了几针，保留时间还没有回到正常位置。

难道是没有清洗干净？我这样问自己。

但是已经冲洗有将近2个小时了，混进去的那一点甲醇，即便是还有，应该也所剩无几了吧？而且此时，我已经加班一个多小时了。于是就决定在正常做样之前再加上一针，设置采集时间为两小时，当做继续平衡色谱柱。然后在自动做样。而我，回家填饱肚子去。

一夜不担心。因为我觉得应该没有什么问题的。第二天上班处理数据就对了。

但是，事实却和我开了个哭笑不得的玩笑。我一夜走了十几个小时，保留时间和发现错误的时候的保留时间是一样的。从而导致我的样品分离度达不到要求，整体数据全部无用！！！

这下傻眼了，老实了。

于是用异丙醇冲了一上午的管路。又用做样的流动相倒换系统折腾了一下午。第二天才做上样，完成预定的任务。前前后后，一共折腾了我三天！！！

[色谱条件]：Agilent 1200；色谱柱：Topsil^TM（拓谱）Sliica Si 4.6*250mm 5μm

检测波长：325nm 流动相：异辛烷-二氯甲烷流速1ml/min

上传几张当时的色谱图，大家可能体会的更深：

图1：混入甲醇后的对照品色谱图

图2：混入甲醇后的样品色谱图（此时，距混入甲醇时已有15小时之多，保留时间仍然不正常）

图3：清洗管路后的对照色谱图

图4：正常做样时的样品色谱图

0
赞贴
74
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

您可能想找: 液相色谱(LC) 询底价

选参数看心得找厂商查方案

专属顾问快速对接

立即提交

可能感兴趣

雪妖

禁止发帖修改昵称

ID：czj_1027

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 15:46:28 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

fengmo真是个好同志，这么好的经验都和大家分享，最主要的是很有一颗专研的心，如果马虎一点的可能就会觉得是不是柱子坏掉了，这个经验太重要了，理论会认为应该是没有什么问题的，谁知道影响居然这么大，学习了，也受教了。

赞贴

拍砖

fengmo4668

禁止发帖修改昵称

ID：fengmo4668

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 15:46:33 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

{结论}：
1. 不管什么时候，做实验一定要静下心来。心不静，最好别做试验。
2. 甲醇在异辛烷-二氯甲烷体系中这么“顽强”的存在，确实大大的出乎了我的意料。看来要好好更新一下我的知识体系里面“不互溶”的这个概念了。

{讨论}
1. 这次的“侥幸”没有成功。如果是你，你会有我这样的侥幸心理吗？你会是我一样的操作，还是直接不做样了，去冲管路呢？你为什么这样选择呢？
2. 你认为甲醇是通过什么样的机制来影响目标物的色谱行为的呢？

赞贴

拍砖

samanthalas

禁止发帖修改昵称

ID：samanthalas

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 15:49:54 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以拍个电影.

赞贴

拍砖

happy王子矜

禁止发帖修改昵称

ID：wangzijin

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 15:53:56 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

所以说，我置换正反相的时候，不管用到用不到，四个通道全部放一个瓶子里走异丙醇。

赞贴

拍砖

fengmo4668

禁止发帖修改昵称

ID：fengmo4668

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 15:59:11 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 雪妖(czj_1027) 发表:
fengmo真是个好同志，这么好的经验都和大家分享，最主要的是很有一颗专研的心，如果马虎一点的可能就会觉得是不是柱子坏掉了，这个经验太重要了，理论会认为应该是没有什么问题的，谁知道影响居然这么大，学习了，也受教了。

我也没有想到甲醇在这个体系中会有这么大的耐久力，真是更新知识体系了。

赞贴

拍砖

fengmo4668

禁止发帖修改昵称

ID：fengmo4668

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 16:00:25 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 samanthalas(samanthalas) 发表:
可以拍个电影.

拍电影，没有主题呀，呵呵

赞贴

拍砖

fengmo4668

禁止发帖修改昵称

ID：fengmo4668

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 16:03:26 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 happy王子矜(wangzijin) 发表:
所以说，我置换正反相的时候，不管用到用不到，四个通道全部放一个瓶子里走异丙醇。

我们的仪器不是专机专用，经常是几个检验项目公用一台仪器。
如果每次都这样全部通道都走异丙醇，是不是也是浪费呢？

而且，根据我以前的经验，异丙醇对正相系统的保留时间的影响也是比较大的。也会造成不必要的时间浪费、溶剂浪费。

赞贴

拍砖

happy王子矜

禁止发帖修改昵称

ID：wangzijin

行业：其他

积分：0升级还需100积分

声望：0升级还需100声望

注册时间：0000-00-00

最后登录时间：0000-00-00

进入iLog 私信关注

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2012/10/25 16:18:52 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 fengmo4668(fengmo4668) 发表:
原文由 happy王子矜(wangzijin) 发表:
所以说，我置换正反相的时候，不管用到用不到，四个通道全部放一个瓶子里走异丙醇。

我们的仪器不是专机专用，经常是几个检验项目公用一台仪器。
如果每次都这样全部通道都走异丙醇，是不是也是浪费呢？

而且，根据我以前的经验，异丙醇对正相系统的保留时间的影响也是比较大的。也会造成不必要的时间浪费、溶剂浪费。

不觉得会浪费啊，置换的时候冲一个管路也是冲，冲四个还是冲。切回来的时候一样。不是专机专用的情况下，先异丙醇，然后用的两个通道换要用的溶剂，系统完全ok情况下上柱子，平衡时间快很多。有时候会切正相的仪器，保持不用的管路是异丙醇，就算不小心异丙醇进了系统，洗掉也比其他溶剂污染容易处理。因为我做正相基本都是手性柱，为了它的安全，我也不敢留水在CD通道，万一不小心，柱子就挂了。可能我们的关注点不一样吧。

赞贴

拍砖