主题：【分享】文献检索任务一八四（184.1-184.10）

184.2　梯度洗脱HPLC法测定头孢噻肟钠的有关物质

作者： 李业欣（哈药集团制药总厂,黑龙江哈尔滨,150086）

摘要：目的：建立梯度洗脱HPLC法测定头孢噻肟钠的有关物质。方法：采用DiamonsilC18（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱，0．05mol／1磷酸盐缓冲液～甲醇（86：14）为流动相A，0．05mol／1磷酸盐缓冲液一甲醇（60：40）为流动相B，梯度洗脱，流速1．0ml／min，检测波长235nm，柱温35℃。结果：头孢噻肟在1．0～31．7μg／ml范围内，浓度与峰面积呈良好线性关系，r=0．9999。结论：本法简便，准确，可定量测定头孢噻肟钠的有关物质。

谱图：无

184.3　RP-HPLC测定百令颗粒的含量

作者： 桑瑞艳，黄雪慧（杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司,浙江杭州,310012 ）

摘要：目的：建立百令颗粒质量标准的测定方法。方法：色谱柱为迪马C184.6×250mm,5μ;柱温：室温;流动相：0.04mol/L磷酸二氢钾-乙腈（95：5）,流速1.0ml/min,检测波长260nm。结果：百令颗粒制剂能较好的分离,且线性良好（r=1）,表明腺苷在0.02μg～0.22μg范围内具有良好线性关系。平均回收率（n=6）为98.53%,相对标准偏差1.33%;样品溶液在12小时内稳定。结论：方法简便,重复性好,适用于该产品含量测定。

谱图：

184.4　HPLC法测定注射用甲磺酸加贝酯中甲磺酸加贝酯的含量

作 者： 马雯雯(哈尔滨誉衡药业股份有限公司,黑龙江,哈尔滨,150025)； 张媛媛(黑龙江天龙药业股份有限公司,黑龙江,哈尔滨,150060)

摘要：目的:建立注射用甲磺酸加贝酯中甲磺酸加贝酯的含量测定方法.方法:高效液相色谱法,Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5 μm)色谱柱,甲醇-醋酸/醋酸钠缓冲液[取醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)4ml,加水稀释至100ml]-十二烷基硫酸钠溶液(取十二烷基硫酸钠5g,加50%甲醇溶液溶解并稀释至100ml)-庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠5g,加50%甲醇溶液溶解并稀释至100ml)-异丙醇(450:150:2:2:8);检测波长为236nm.结果:0.1056mg/ml～0.5280mg/ml浓度范围内,甲磺酸加贝酯浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.52%,RSD为0.33%.结论:本方法简便、准确,可有效测定注射用甲磺酸加贝酯中甲磺酸加贝酯的含量.

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184.5　高效液相色谱法测定盐酸克林霉素阴道泡腾片中盐酸克林霉素含量

作  者： 赵大伟，王佩华，孙丽梅，刘海燕，王斌，张腾霄，陈洪玉（绥化学院制药与化学工程系,黑龙江,绥化,152061）

摘要：目的:建立测定盐酸克林霉素阴道泡腾片含量的方法.方法:使用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长214nm,0.025mol/L磷酸二氩铵溶液(以磷酸调节pH=2.9)-乙腈(60:40)为流动相.流速:1.0ml/min..结果在60.0μg-480.0μg/mL范围内有良好的线性,平均回收率为93.78%,RSD为1.05%(n=6).结论:该法操作简便,结果准确,灵敏度高,重现性好,可用于盐酸克林霉素阴道泡腾片的质量控制.

谱图：无

184.6　HPLC法测定红碎茶中咖啡因的含量

作 者： 毕秀清 （哈药集团制药六厂,黑龙江,哈尔滨,150000 ）

摘要：目的:建立高效液相色谱法测定红碎茶中咖啡因的含量.方法:流动相:0.02mol/L醋酸铵-甲醇(75:25);色谱柱:Diamonsil ODS
C185μm 200mm×4.6mm;检测波长:254nm;流速:1.4ml/min;进样量:20μl,外标法以峰面积定量,理论板数按咖啡因计算不低于3000.结果:咖啡因在5～25μg/ml范围内呈良好的线性关系(r＝1.0000),平均回收率为99.78%,RSD为0.53%(n=5).结论:本方法稳定,重现性好,收率好,结果准确,可作为红碎茶中咖啡因的含量测定方法.

谱图：无

184.7　HPLC法测定参皇软膏中人参皂苷Rg1的含量

作 者： 黄波，杜鸣（哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069 ）

摘要：探讨参皇软膏中人参皂苷Rg1含量的另一种测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18,乙腈-0.05%磷酸溶液(100∶400)为流动相,检测波长为203nm,流速1.0ml/min,以外标法按峰面积计算.结果:人参皂苷Rg1进样量在0.1253ug～0.7518ug范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),该法重现性好与薄层扫描法有很好的规律对应.结论:本法与薄层扫描比较有准确、检验周期短的优点,可替代现有的薄层扫描法.

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184.8　HPLC法测定不同产地钩藤中异钩藤碱和钩藤碱的含量

作 者： 郭星，曾常青（广东药学院中药学院,广东,广州,510006 ）

摘要：目的:建立高效液相色谱测定不同产地的钩藤中异钩藤碱和钩藤碱的方法.方法:采用Diamonsil-C18色谱柱,流动相为甲醇:0.2%氨水(65:35),检测波长245 nm.结果:线性范围0.08805-0.8805μg和0.04076-0.4076μg,相关系数为0.9996和0.9997,平均回收率异钩藤碱为97.03%,钩藤碱为98.95%,RSD分别为1.79%和2.55%.结论:高效液相色谱法可为钩藤质量控制标准的制定提供相应的依据.

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184.9　仙灵壮骨胶囊中川续断皂苷VI的含量测定

作 者： 刘基柱，邓小慧，李淑贤，付利娇，王俊永（广东药学院,广东,广州,510006 ）

摘要：目的:建立仙灵壮骨胶囊中川续断皂苷VI的含量测定方法.方法:采用反向高效液相色谱法.采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(30:70);流速为1.0 L/min;检测波长为212 nm.结果:川续断皂苷VI在3.09-30.9 μg范围内呈良好线性关系,r=0.9998;平均回收率为100.31%,RSD为2.84%.结论:所建立的方法可准确、快速地测定仙灵壮骨胶囊中川续断皂苷VI的含量,可用于该制剂的质量控制.

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184.10　大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷制备方法的探索

作  者： 牟淑慧 （北京中医药大学）

摘要：大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷存在于大黄、何首乌、虎杖等中药中，近年的研究表明其对脑中真性乙酰胆碱酯酶活力具有可逆性的抑制作用，可提高中枢的乙酰胆碱含量，而且，对海马神经元损伤具有一定的保护作用，因此，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷既是一种真性乙酰胆碱酯酶可逆性抑制剂，又是海马神经元损伤保护剂，对老年性痴呆等疾病的发生和发展的多个环节有改善作用。大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷显著改善由东莨菪碱导致的小鼠学习记忆功能障碍，并显著提高正常小鼠学习记忆获得能力，与阳性药物石杉碱甲比较，两者无显著性差异。因此，利用大黄素-8-P-β-D-葡萄糖苷来防治老年性痴呆症或提高智力有良好的开发前景。
自然界含有大黄素的中药材(虎杖、何首乌、大黄、决明子等)中多含有一定量的大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，但含量较低。目前，生物转化已成为天然产物结构修饰和改造的有利工具，它是利用生物代谢过程中产生的酶对外源性物质进行结构修饰和改造的化学反应。具有选择性高、条件温和、无污染、成本低、副产物少等优点。因此，本课题欲通过生物技术制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷，研制开发防治老年性痴呆的药物，对已逐渐进入老年化的当今社会具有不可低估的意义。
第一部分文献研究 一、对何首乌、虎杖中的化学成分及药理作用进行综述； 二、对生物转化及生物酶法提取在中药中的应用及进展进行综述。
第二部分大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷制备方法的研究
第一章经典方法制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷采用溶剂回流提取-柱色谱分离法分别从中药何首乌和虎杖中分离得到大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷，大黄素及白藜芦醇苷。
第二章生物法制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷
一、植物培养物对大黄素的生物转化制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷首次采用植物培养物对大黄素进行生物转化，并以转化率为指标筛选出最佳的转化条件。
首次建立长春花悬浮细胞培养体系中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷含量测定的方法：色谱柱：Diamonsil<'TM>(钻石)C<,18>色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；
流动相：甲醇-水-甲酸(70：29.6：0.4)V/V；流速：1mL·min<'-1>；检测波长：280nm；柱温：室温。回归方程：Y=3E+06X-54.143，相关系数r=0.9998，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围：0.015μg～0.075μg。
二、生物酶法从中药材中提取结合葸醌的最佳工艺筛选首次采用正交实验法优化筛选用纤维素酶法从大黄中提取结合葸醌的最佳工艺。以结合葸醌平均含量(％)和干膏率的平均值为两指标，采用加权法来综合评价，结合葸醌平均含量(％)的得分(X)的权为60％，干膏率平均值的得分(Y)的权为40％，综合评分为Z=60％X+40％Y，最佳工艺40℃，酶解1h，pH=7。
三、微生物酶转化法外源物质6-乙酰大黄素制备实验条件
筛选6-乙酰大黄素是微生物酶转化制备大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的外源物质。本实验采用单因素法、以IR光谱测定结果及TLC结果为参考，筛选出制备6-乙酰大黄素的最佳条件：取精制大黄素置三角瓶中，50℃干燥1h，以大黄素-试剂(1：3)加入醋酐，于沸水浴回流，迅速加入冷水，振摇，冰箱放置，抽滤，水洗，50℃干燥，即得。
第三部分何首乌药材中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定
首次建立何首乌药材中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定的方法：色谱柱：Diamonsil<'TM>(钻石)C<,18>色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-水-甲酸(70：29.6：0.4)V/V；流速：1mL·min<'-1>；检测波长：280nm；柱温：室温。回归方程：Y=3E+06X+2187.5，相关系数为r=0.9999，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷线性范围在0.060μg～0.300μg。含量测定结果表明，该方法操作简便，结果准确，具有良好的重复性，回收率合格，可用于测定何首乌中大黄素-8-O-β-D-前萄糖苷的含量，测定结果为0.086％。

谱图：