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主题：【分享】生物样品能谱检测展示图-剑桥大学 神经系统研究室

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发表于：2013/01/29 11:24:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该研究所主要研究Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒的毒性作用，方法是将该颗粒加入到健康细胞中，判断健康细胞的生命力。

检测手段：采用电镜+能谱的方式，首先检测健康细胞，通过对K:Na的含量比来确认（K：Na含量约8～12：1，认为该细胞是健康细胞；若约为3：1，认为该细胞是死亡细胞）之后加入Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒，采用能谱的手段检测细胞内是否已成功注入，并判断K:Na的含量比，确认细胞死活。

结果显示



首先对活细胞检测，使用低加速电压+大面积能谱仪，确保在低加速电压及低束流下也能够采集到足够多的X射线计数用于能谱分析，并得到K：Na含量大于10：1，即该细胞是健康细胞。

之后注入Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒，再对该细胞进行能谱检测并得到：由谱图显示明显的Ca峰，确认该颗粒注入成功，并通过K:Na约为1.5：1，认为该细胞是死亡细胞



结果显示，确认该颗粒是杀死细胞的凶手。

本实验需要注意的地方是：生物材料的特殊性无法在较高的电压电流下长时间照射，否则会严重破坏细胞的活性，无法判断究竟是能量或毒药杀死的细胞。因此理想状态是在低能量快速检测该细胞最好，该实验使用牛津仪器出品的大面积的能谱仪，可以确保能量较低时，快速收集到足够多的x射线信号，保证能谱分析的有效性。
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2013/1/29 11:35:22 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
因为本人对生物学不是特别了解，不知该文章判断细胞死活的方法是否有普适性，大家请按照各自细胞的真实特点来判断，并不需要坚持文章所描述的方法K：Na的比例来判断
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2013/2/22 12:34:23 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
本版做生物的不多是不啊
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fengyonghe
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2013/2/22 13:53:02 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
正如你说的，我从谱图看收谱时间是很短的。大面积谱仪的优点显示出来了。
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insulater
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2013/4/9 22:06:49 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sept(sept) 发表:
该研究所主要研究Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒的毒性作用，方法是将该颗粒加入到健康细胞中，判断健康细胞的生命力。



检测手段：采用电镜+能谱的方式，首先检测健康细胞，通过对K:Na的含量比来确认（K：Na含量约8～12：1，认为该细胞是健康细胞；若约为3：1，认为该细胞是死亡细胞）之后加入Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒，采用能谱的手段检测细胞内是否已成功注入，并判断K:Na的含量比，确认细胞死活。

进chamber的细胞还能保证是活细胞

然后还能通过K：Na含量比来确认细胞的死活

不要出来忽悠人了。。。。！！！


结果显示



首先对活细胞检测，使用低加速电压+大面积能谱仪，确保在低加速电压及低束流下也能够采集到足够多的X射线计数用于能谱分析，并得到K：Na含量大于10：1，即该细胞是健康细胞。

之后注入Ca5[PO4]3[OH]纳米颗粒，再对该细胞进行能谱检测并得到：由谱图显示明显的Ca峰，确认该颗粒注入成功，并通过K:Na约为1.5：1，认为该细胞是死亡细胞



结果显示，确认该颗粒是杀死细胞的凶手。

本实验需要注意的地方是：生物材料的特殊性无法在较高的电压电流下长时间照射，否则会严重破坏细胞的活性，无法判断究竟是能量或毒药杀死的细胞。因此理想状态是在低能量快速检测该细胞最好，该实验使用牛津仪器出品的大面积的能谱仪，可以确保能量较低时，快速收集到足够多的x射线信号，保证能谱分析的有效性。
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fengyonghe
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2013/4/10 0:14:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进了chamber的细胞应该是死了，但这之前的K:Na可以保留下来吧。
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asahi42
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2013/4/10 9:36:54 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 fengyonghe(fengyonghe) 发表:
进了chamber的细胞应该是死了，但这之前的K:Na可以保留下来吧。


细胞一旦死亡，细胞膜上的离子通道就会失效，Na+ K+泵主动转运停止，转以被动扩散，细胞死亡越久，其比例越失真。insulater兄的考虑不无道理，但是目前来看还是可以保证进Chamber的细胞仍然能活的~这个实验我还在筹划。
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2013/4/10 9:37:47 Last edit by asahi42
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