主题:【第六届原创】C18色谱柱不保留的物质你怎么测

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zqy0797
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C18色谱柱通常都是用在反相色谱中,化合物流出色谱的顺序遵循的原则是按照极性大小,极性大的先出峰,极性小的后出峰。假如以C18色谱柱为固定相,甲醇和水为流动相,当流动相中增加甲醇的比例,化合物在C18色谱柱上的保留时间会提前,因为流动相的洗脱能力增加。我想做液相的新手都是这样来记住液相色谱出峰的问题的,从而根据这个可以来改变有机相比例,达到改善分离度的问题。

可是如果一个物质在C18柱不被保留或者出峰很快,我们应该怎么测?你有没有什么好办法?

我想更多人应该是在流动相中加离子对试剂,而且大部分标准方法也是这么来做的,当然这也是一个方法,但是也不是所有物质都管用,对某些在C18柱上不保留的物质就影响微乎其微。我认为,一个物质分离,最关键的还是固定相,而不是流动相。

而我想说的是,大家可以尝试另外一个方法,C18不保留的物质,可以试一试用正相色谱柱来分离,比如氨基柱。氨基柱就可以用反相流动相系统,尽管它在用反相流动相系统时寿命很短,但是我认为用来尝试测试一些特殊的物质组分,也是不错的选择。假如以氨基色谱柱为固定相,乙腈和水为流动相,当流动相中增加乙腈的比例,化合物在氨基色谱柱上的保留时间会延迟,而不是提前,这个恰恰跟C18柱相反,从而可以让在C18柱上不保留的物质,在氨基柱上保留,达到分离。


这个是我做的色谱图,C18柱不被保留,后来换了氨基柱做的

图1标准图




图2 样品图



C18色谱柱不保留的物质你怎么测,你试过用氨基柱的方法吗?
该帖子作者被版主 老多_小多10积分, 2经验,加分理由:原创大赛奖励,不过作品有点简单
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jianhuilcn
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试过,测定单糖类或低聚糖类化合物时,就试过用氨基柱测
hujiangtao
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letianshi
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甜菊糖就是用氨基柱 不过是因为C18柱两个峰分离度不够 分不开 氨基柱确实是基本一个月就报废掉了
fitness
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流动相,固定相,化合物就这三方面考虑吧
houjjun
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阿图
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氨基柱原来需要什么样的体系做流动相呢?
andyglp
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现在测的磷酸肌酸,在C18柱上就不保留。试过加四丁基溴化铵离子对。也不保留,可是没有氨基柱呀。晕呀~
大空
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还有一个思路,可以看看目标物质能不能有什么衍生化反应,反应生成一个在C18上有保留的物质即可,这样的成本比氨基柱便宜得多~当然,局限就是一定得能够有不干扰其他待测组分的衍生化。
zhoujin83
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lujianbo0918
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现在也有反相的氨基住了啊,寿命比较长了,好于就是亲水色谱哦,也是一个方法啊