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主题：【已应助】有谁做过质谱绝对定量蛋白

浏览0 回复9 电梯直达
纯粹
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发表于：2013/11/26 21:16:55 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有没有人做过质谱绝对定量蛋白的？
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2013/11/27 16:58:29 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没做过，纯粹顶你，呵呵
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sukiliang
sukiliang
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2013/11/27 17:09:19 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵，我也是没做过啊，希望有朋友帮楼主解答一下
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continuum
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2013/11/29 13:27:47 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
绝对定量？ 没做过 应该是用切碎的peptide作？
那标准品要用whole protein去切 or 直接拿peptide？
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hujiangtao
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2013/11/29 13:41:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
孤陋寡闻了 咋没说过呢
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剑
kreanu
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2013/11/30 3:17:04 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看人做过
所谓的Absolute  Quantitation,他们还生造了一个缩略语AQUA，直接在你的样品里加入AQUA 多肽段定量就行了
你有什么问题？
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chrushcc
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2013/12/3 19:21:59 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我没做过，但是我们公司可以做，类似于小分子的定量方式，先shotgun你的蛋白，然后选取合适的肽段，然后用去合成标准肽段，用标准肽段来做标曲，然后run你的样品，带到标准曲线里面算。也有用同位素标记做内标校准的。一般都用三重四级杆做。
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纯粹
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2013/12/5 21:56:04 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 continuum(continuum) 发表:
绝对定量？ 没做过 应该是用切碎的peptide作？
那标准品要用whole protein去切 or 直接拿peptide？
是的！直接买peptide就是我要的序列
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纯粹
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2013/12/5 21:57:06 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 chrushcc(chrushcc) 发表:
我没做过，但是我们公司可以做，类似于小分子的定量方式，先shotgun你的蛋白，然后选取合适的肽段，然后用去合成标准肽段，用标准肽段来做标曲，然后run你的样品，带到标准曲线里面算。也有用同位素标记做内标校准的。一般都用三重四级杆做。[/quote

你们公司都是自己合成肽段吗]
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chrushcc
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2013/12/9 20:38:59 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不是，外面公司买的
原文由 纯粹(v2800082) 发表:
原文由 chrushcc(chrushcc) 发表:
我没做过，但是我们公司可以做，类似于小分子的定量方式，先shotgun你的蛋白，然后选取合适的肽段，然后用去合成标准肽段，用标准肽段来做标曲，然后run你的样品，带到标准曲线里面算。也有用同位素标记做内标校准的。一般都用三重四级杆做。[/quote

你们公司都是自己合成肽段吗]
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