主题:【讨论】氨基柱做二羟基丙酮,为啥2个月不到分离度就不好了?

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zy178
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能不能清洗下呢?


您有什么好的清洗建议?
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换根新柱子试一下。


换了一根,又正常了,这根柱子应该是坏了,不是系统原因


是的,这根柱子的使用年限比较短。


想找到寿命短的原因,对症下药提高使用寿命,这样耗也吃不消
wsy18
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能不能清洗下呢?


您有什么好的清洗建议?


疑似本版面就有这方面的介绍与讨论。
ECHO007
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是的,这根柱子的使用年限比较短。


想找到寿命短的原因,对症下药提高使用寿命,这样耗也吃不消


这样最好。
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是的,这根柱子的使用年限比较短。


想找到寿命短的原因,对症下药提高使用寿命,这样耗也吃不消


这样最好。


把柱子拆开来看了一下,发现柱头已经泛黄,严重污染了
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这样最好。


把柱子拆开来看了一下,发现柱头已经泛黄,严重污染了


差异很大,每次使用后,冲洗不到位?
wsy18
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氨基柱在含水量多的情况下很不稳定,也不宜在强酸环境下使用。氨基柱本质上属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但要求乙腈含量不得低于60%,含水过多的流动相对氨基柱有损害。
氨基柱使用注意事项:
1反相条件下使用时要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水比例越高也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0
2. 流动相必须过滤,色谱级的乙腈,水相采用0.22um的滤膜过滤的超纯水。如使用的流动相中含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内析出。
3.色谱柱的冲洗:流动相如果含有缓冲盐,实验分析完毕之后,用不少于缓冲盐比例的纯水、乙腈冲洗10倍-20倍柱体积,(但纯水量不宜超过40%,例如用的流动相是30%的缓冲液,则可用35%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来),再用100%乙腈冲洗10倍柱体积,之后保存在100%乙腈中。
4. 色谱柱的保存:反相使用时,如短期不用,可用乙腈保存;长期不用时最好用异丙醇充分置换,最后用正己烷保存。
5.建议使用保护柱,并及时更换保护柱。
zy178
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这样最好。


把柱子拆开来看了一下,发现柱头已经泛黄,严重污染了


差异很大,每次使用后,冲洗不到位?


黄色那根是这个项目用的柱子,白色那根是随便拿的一根,只是为了比较颜色差异

冲洗是一方面,样品如果吸附力太强,冲也冲不下来
zy178
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氨基柱在含水量多的情况下很不稳定,也不宜在强酸环境下使用。氨基柱本质上属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但要求乙腈含量不得低于60%,含水过多的流动相对氨基柱有损害。
氨基柱使用注意事项:
1反相条件下使用时要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水比例越高也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0
2. 流动相必须过滤,色谱级的乙腈,水相采用0.22um的滤膜过滤的超纯水。如使用的流动相中含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内析出。
3.色谱柱的冲洗:流动相如果含有缓冲盐,实验分析完毕之后,用不少于缓冲盐比例的纯水、乙腈冲洗10倍-20倍柱体积,(但纯水量不宜超过40%,例如用的流动相是30%的缓冲液,则可用35%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来),再用100%乙腈冲洗10倍柱体积,之后保存在100%乙腈中。
4. 色谱柱的保存:反相使用时,如短期不用,可用乙腈保存;长期不用时最好用异丙醇充分置换,最后用正己烷保存。
5.建议使用保护柱,并及时更换保护柱。



谢谢分享
vcningmeng
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主要还是和分析的物质有关系,要看吸附的物质的极性,选择冲洗的流动相
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