原文由 wsy18(wsy18) 发表:
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氨基柱在含水量多的情况下很不稳定,也不宜在强酸环境下使用。氨基柱本质上属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但要求乙腈含量不得低于60%,含水过多的流动相对氨基柱有损害。
氨基柱使用注意事项:
1反相条件下使用时要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水比例越高也越有发生水解的危险。最理想的pH范围在pH 3.0-7.0
2. 流动相必须过滤,色谱级的乙腈,水相采用0.22um的滤膜过滤的超纯水。如使用的流动相中含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内析出。
3.色谱柱的冲洗:流动相如果含有缓冲盐,实验分析完毕之后,用不少于缓冲盐比例的纯水、乙腈冲洗10倍-20倍柱体积,(但纯水量不宜超过40%,例如用的流动相是30%的缓冲液,则可用35%比例的纯水将缓冲盐缓慢洗脱出来),再用100%乙腈冲洗10倍柱体积,之后保存在100%乙腈中。
4. 色谱柱的保存:反相使用时,如短期不用,可用乙腈保存;长期不用时最好用异丙醇充分置换,最后用正己烷保存。
5.建议使用保护柱,并及时更换保护柱。