主题：【第八届原创】盐酸多西环素注射液（IV）含量的测定

盐酸多西环素注射液（IV）含量的测定
实验部分：
原理：精密量取处理好的样品及对照品，稀释后注入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性、峰面积定量）计算，得出该样品中多西环素的含量。
仪器及试剂
仪器：安捷伦1100高效液相色谱仪，配置紫外检测器+等度泵+柱温箱+在线脱气机等
电子天平（万分之一）
试剂
甲醇:色谱级  已睛：色谱级 
草酸铵，二甲基甲酰胺，磷酸氢二铵，氨水，盐酸均为分析纯
标准物质
土霉素对照品（中国兽医药品监察所生产）
土霉素（化学对照品）（中国食品药品检定研究所生产）
美他环素（化学对照品）（中国食品药品检定研究所生产）
-多西环素（化学对照品）（中国食品药品检定研究所生产）
多西环素（化学对照品）（中国食品药品检定研究所生产）
色谱条件：
流动相：0.05mcl/l草酸铵溶液：二甲基甲酰胺：0.2mcl/l磷酸氢二铵溶液=65:30：5（ph=8.0）
柱温：35℃ 
检测波长：280nm
流速：1.0ml/min
进样量：20um
对照品及样品的制备
系统性试验：称取土霉素、美他霉素、-多西环素、多西环素对照品适量，加0.01mcl/l盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml含土霉素、美他环素、多西环素及多西环素均加0.08mg的混合溶液。上机测定：理论塔板数n不低于1500，分离度R大于1.5
样品的配制
1.1盐酸多西环素注射液（IV）10ml:0.5g
精密量取供试品1ml，置于50ml量瓶，加0.01mcl/l盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml，置于25ml量瓶中，加0.01 mcl/l盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。
1.2对照品溶液的制备（多西环素对照品含量为85.2%）
精密称取多西环素对照品约25mg,置于25ml量瓶中，加入，加0.01 mcl/l盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。
精密量取2ml，置于25ml量瓶中，加0.01 mcl/l盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀
色谱图
系统性试验溶液色谱图 ：


                                                        图2标准品色谱图


                                                                            图3 被测样品色谱图
计算及结果

样品中被测物含量计算公式：
标示量%=
A—供试品中被测物峰面积值
As—对照品中被测物峰面积值
Ms—对照品的重量。单位为g.
M—供试品的取样量。单位为ml
Cs—对照品的含量。85.2%。
Ds—对照品的稀释倍数。
D—供试品的稀释倍数。
B—样品的标示量。
经计算该兽药中多西环素含量为99.7%，含量合格，符合药典规定。

结论
该方法对药典方法略作修改，得到不错的检测效果。
由图1可以看出，该方法的系统实验，理论塔板数为1883，分离度为4.4，满足检测条件。