楼主分析的样品是蜂蜜,测定蜂蜜中二糖和三糖等。方法参照文献进行。
主要步骤为:0.5g 蜂蜜溶解在25ml 80%乙醇中,取1ml蜂蜜水溶液然后加1ml 内标(苯基葡萄糖苷,溶于80%乙醇)氮吹干后,在55℃烘箱烘干30分钟,先加入200 uL 2.5%盐酸羟胺(溶于吡啶),75℃反应30min,然后加入200 uL HMDS+TMS_PYRIDINE(3:1:9)衍生剂,45℃,30min。上清进
气质分析。柱子是DB-5。选择不分流进样,气体流速1ml/min。定量采用内标法定量,即目标化合物峰面积与内标峰面积比为纵坐标,浓度比为横坐标。
问题是样品中内标的峰面积比标样中小很多,而且内标峰面积在不同样品中很不稳定。求助是什么原因??
完全是按照文献中方法做的。
样品中内标的峰面积比标样中小,推测原因是基质影响,可能是样品中其他物质也和衍生剂反应,所以内标峰面积变小。
样品中内标不稳定是加入的衍生剂量不够导致的吗??
衍生化方法怎么优化前处理和衍生的方法??