液相色谱之家
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主题:【第九届原创】一网打尽:岛津、安捷伦、赛默飞液相大PK

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长胡子的菩提
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9月二等奖

题记:



谨以此文献给当年在迪亚药谷8楼一起奋战过的小伙伴,在那里我收获了几个铁铁的哥们姐们,收获了很多的知识和经验,当然也要感谢我的同学蜡笔小“辛”拉着我一起去参加面试才把我领上道,那儿是一个值得纪念的地方,有机会还会去转转,看看以前用过的设备,看看老同事,虽然没几个认识的了。怀旧也是一种情怀。
很久很久以前作为一名医药外包公司的小实验员,每天一睁眼就要想着搬砖了,今天要做多少批样品,每针Xmin(手动进样),中间可以做几批样品的水分、旋光、熔点。。。下午几点能完活,如果不能正点下班,是要加班费还是攒时长换休?还是换休吧,加班费也没什么吸引力,还是出去玩比较有吸引力。。。好了别想了再想就该迟到了,幻想着美好的生活就这么开始了。我们实验室相当和谐,互帮互助的,夜班做完自己的工作之后,都会给白班的人平衡好柱子,这样白班的人来了可以直接开始一天正式的工作了,提高工作效率,想想还很怀念实验室的生活,忙忙碌碌,很充实。
言归正传还是来说说这三个牌子的液相色谱吧。
假如你想买一套液相色谱仪,你都想了解点什么呢?从哪里了解呢?往下看!
PK一定有输赢吗?一定能分出好坏吗?三个牌子的液相哪个好?见仁见智,个人觉得能满足实验需求又经济就是好的,做个QC非要用nano的液相?杀鸡焉用宰牛刀。
A岛津液相色谱仪

B安捷伦液相色谱仪

C赛默飞液相色谱仪

以下所有液相色谱仪数据均来自各品牌的官网
岛津北美:(http://www.ssi.shimadzu.com/
岛津中国 :http://www.shimadzu.com.cn/
安捷伦:http://cn.agilent.com/
赛默飞:http://www.thermofisher.com/
开始PK
1、控制连接方式:
岛津:
大家实验室最常见的估计就是LC20AT的泵+SPD20A的紫外检测器有银子的配原装的柱温箱和自动进样器,缺粮饷的用国产的柱温箱加Rheodyne手动进样阀。土豪们还会用多检测器串联和多阀多柱切换多维应用,羡慕嫉妒恨的节奏。各模块用光纤连接到CBM上,CBM是通过以太网连接电脑,其中CBM-20A最多可以控制8个模块,而卡式的CBM-20Alite除了A泵之外还可以控制4个模块,也就是说不是有钱就能任性想配多少模块就能配多少模块的,想到这里就舒服了土豪和我们屌丝也得在一个起跑线上了,哈哈哈哈



安捷伦:各模块之间用CAN线连接,每个模块后部都有两个CAN口用CAN线串联起来,检测器多一个LAN口,LAN口是检测器和PC进行通讯的端口,用LAN线相连。注意CAN口和LAN口不能混用否则容易烧主板。

赛默飞:除了溶剂架之外,其他模块都可以用USB线连接到电脑上,厂家推荐将各模块连接到检测器之后,将检测器与电脑相连,如下图

2、主要模块
泵:
没事逛逛岛津的官网,不看不知道一看吓一跳,官网上列举的液相色谱系统型号有17种之多(北美网站是15种),其中三个系列9种泵,这还不包括咱们大中国组装的LC-15C和LC-16、LC-16P以及一体机2010中的泵。是不是很壮观同时也是有点懵圈的节奏,咱们一起来梳理一下。

品牌

系列

型号

Pmax

流速范围ml/min

特点



岛津


Nexera


LC-30AD


130Mpa


0.0001-5.000


并联双柱塞


Prominence UFLC nano


LC-20ADnano


1nL/min-5000nL/min(Flow rate setting range (Standalone))
100nL/min-5000nL/min (LCsolution CBM-20A) 10nL/min-5000nL/min (Nano-Assist)
(Flow rate setting range (External control))


并联双柱塞


Prominence


LC-20AD


40(20)


0.0001—10.0000


并联双柱塞


LC-20AT


40(20)


0.001—10.000


串联双柱塞


LC-20AB


40


0.0001 到—10.0000


二元高压梯度泵,集成了两个20AD输液泵


Prominence UFLCXR


LC-20ADXR


0.0001 —5


LC-20ADXR 输液泵可以在更高压力下实现稳定的溶剂输送,并且标准配置自动清洗装置,确保高压输液下消耗品的寿命。


LC-20AP 制备泵


40


0.01 —150.0


LC-6AD 半制备泵


49


0.01 —20.000


并联双柱塞


LC-10Ai 惰性泵


19.6


0.001-5ml/min(1-27.4MPa), 5.001-9.999ml/min (1-19.6MPa);


惰性泵专为分析生物样品设计,全面采用生物相容性流路


Essentia(国内生产)


LC-15C


40


0.0001-10


串联双柱塞


LC-16


40


0.001-5


串联双柱塞


安捷伦


1290


Infinity Ⅱ高速泵(G7120A)


130


2(130MPa)
5(80Mpa)


双柱塞


InfinityⅡ全能泵(G7104A)


130


2(130MPa)
5(80Mpa)


双柱塞


1260


Infinity 毛细管泵(G1376A)


40


20ul/min


双柱塞


Infinity II 二元泵(G7112B)


60


5


双柱塞


Infinity II 生物惰性泵(G5654A)


60


5(60MPa)
10(20Mpa)


四元混合,PH  1-13短期14


Infinity II等度泵(G7110B)


60


5(60MPa)
10(20Mpa)


双柱塞


Infinity II 四元泵(G7111B)


60


5(60MPa)
10(20Mpa)


双柱塞


Infinity 纳流泵


40


4ul/min


双柱塞


Infinity 制备泵


40


100


双柱塞


赛默飞


U3000


ISO-3100SD等度标准泵


62


0.001-10


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


ISO-3100BM生物兼容等度标准泵


41


0.001-2.5


生物兼容系统,双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


HPG-3200SD二元高压梯度标准泵


62


0.001-10


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


HPG-3200RS二元高压梯度快速泵


103


0.001-8


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


HPG-3200BX二元高压梯度半制备泵


16


0.001-50


生物兼容系统,双柱塞往复泵有专利的后密封漏液检测微滴计数器


HPG-3400SD四元高压梯度标准泵


62


0.001-10


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


HPG-3400RS四元高压梯度快速泵


103


0.001-8


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


LPG-3400SD(N)四元低压梯度标准泵(兼容正相)


62


0.001-10


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


LPG-3400RS四元低压梯度快速泵


103


0.001-8


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


LPG-3400BM四元生物兼容低压梯度泵


50


0.001-2.5


生物兼容系统,双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


LPG-3400XRS四元低压梯度泵


125


0.001-2


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


DGP-3600SD(N)双三元低压梯度泵(兼容正相)


62


0.001-10


生物兼容系统,双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


DGP-3600RS双三元快速泵


103


0.001-8


双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器


DGP-3600BM双三元生物兼容泵


50


0.001-2.5


生物兼容系统,双柱塞往复泵,带有专利的后密封漏液检测微滴计数器




vanquish


Vanquish H二元高压梯度泵


151


0.001-5


6流通溶剂,生物兼容


Vanquish F四元低压梯度泵


103


0.001-8


四通道生物兼容




从上图可以看出,安捷伦和赛默飞的某款泵都有阻尼,减小脉冲,岛津的泵没有阻尼,工程师说通过改进泵的结构来减小脉冲的,这个一直没明白如何改进的呢?
检测器
官网上列出的检测器有紫外检测器和二极管阵列检测器,那么其他的检测器呢
岛津中国上只列出了UV和PDA两种检测器,此时发现还是岛津北美网站比较好东西全

那么接下来就详细看看每种检测器的特点和使用范围
CDD(型号CDD10AVP):电导检测器是离子化合物或可解离化合物的专属检测器。电导检测器是对含卤素、硫、氮化合物具有高选择性和高灵敏度的电化学检测器,它是将被测组分变成杂原子氢化物或氧化物,在去离子的溶剂中电离,根据溶剂电导率的变化来检测原组分的含量。一张图看懂CDD检测原理,图是从岛津北美网站正大光明截图的放心看,不用害怕。

CDD是电化学检测器(ED electrochemical detector)的一种。ED包含4种类型:介电性(permittivity)、电导型(conductivity)、电位型(potentiometry)和安培型(amperometry)。以上这些检测器都么有用过,不说了。。。
ELSD:(型号ELSD-LTII)ELSD是比RID优越的多的一种通用型检测器,其灵敏度比RID高,检出限可达ng级,对温度的敏感程度也比RID低得多,而且使用梯度淋洗。ELSD是基于光线通过微笑的粒子时会发生光散射现象,由色谱柱分离的组分进入雾化器中,被高速的载气流喷成雾状,进入蒸发器变成蒸汽,然后被光阱捕集。蒸汽态的溶剂通过光路后,光线反射到检测器后记录成基线,雾状溶质颗粒通过光路时,使光线散射后被广电倍增管手机,得到样品信号。
FLD:(型号Prominence RF-20A/RF-20Axs)FLD是目前各种检测器中灵敏度最高的检测器之一,它是利用某些试样具有荧光特性来检测的,许多有机化合物具有天然荧光活性,其中带有芳香基团的化合物具有的荧光活性很强。在一定条件下,荧光强度与物质浓度成正比。荧光检测器是一种选择性很强的检测器,它适合于稠环芳烃、甾族化合物、酶、氨基酸、维生素、色素、蛋白质、等荧光物质的测定。
PAD:(型号SPD-M30A、SPD-M20A)PAD检测器原理跟UV-VIS相同,只是检测到所有波长的吸收,相当于全扫描的光谱图。
UV-VIS:(型号SPD-20A、SPD-20AV  SPD-20A:波长范围:190 到 700nm。SPD-20AV可设成一种模式: 氘灯和钨灯同时点亮, 在整个紫外和可见波长范围内实现高灵敏度的波长编程检测.波长范围是190 到900nm)适用于对紫外光有吸收的样品的检测。紫外检测器灵敏度高通用性好,要求试样必须有紫外吸收,但,溶剂必须能透过所选波长的光,选择的波长不能用低于溶剂的紫外截止波长。
RID:(型号:RID-20A)基于折射率随介质中的成分变化而变化,如入射角不变,则光束的偏转角是流动相(介质)中成分变化的函数。下图是北美网站的RID的光路示意图

以上这些检测器安捷伦和赛默飞都有,赛默飞还有一种检测器是独一无二的那就是CAD检测器。既然说是独一无二的那就得看看了
电喷雾检测器:
电喷雾检测技术是提供与样品分析物含量成正比的信号。这些信号源对以扩散方式转移至分析物颗粒表面的电离氮分子所产生的电荷的测量。该技术可量化吸引该电荷的分析物颗粒,包括不能电离发色团或不含发色团的颗粒。不论分析物是何种结构,结果均为准确且一致的响应。采用电喷雾检测技术可以测量任何非挥发性和大部分半挥发性分析物。
分析步骤:



  • 电喷雾检测器将洗脱液雾化成液滴,然后干燥成颗粒,颗粒的大小随着被分析物的含量增加而增加。



  • 溶质颗粒与带正电荷的氮气相撞,电荷随之转移到颗粒上,溶质颗粒越大,带点越多。



  • 溶质颗粒吧他们的电荷转移给收集器,通过高灵敏度的静电计测出溶质颗粒的带电量,由此产生的信号电流与溶质的含量成正比。
    付上一张百度文库文献截图,





安捷伦、岛津、赛默飞检测器



之前在论坛里有朋友问过检测器耐压的问题,不同牌子的仪器耐压不一样,同一型号的检测器里面配的流通池体积不一样耐压也不一样,还是去各品牌官网查查比较放心或者直接打400/800。
自动进样器

word里编辑的表格复制过来都乱码了,只能截图了
看完了表再看一下各品牌常见自动进样器的流路示意图
岛津SIL-20A



安捷伦

主路

旁路

赛默飞


从图上可以看出三个品牌的自动进样器的主要区别



  • 岛津自动进样器一个六通阀一个五通阀;安捷伦进样器一个六通阀;赛默飞自动进样器一个六通阀一个三通阀



  • 洗针方式赛默飞和岛津都是流动的洗针液更好的避免交叉污染,安捷伦洗针液为储液瓶。



  • 进样动作安捷伦自动进样器是机械臂移动抓取样品瓶到针座进样口位置吸取样品后进样,岛津自动进样器是进样针移动到进样瓶位置吸取样品进样,赛默飞自动进样器是样品盘转动,进样针移动到相应位置,吸取样品进样。



俗话说师傅领进门修行在个人仪器买完安装完之后,用得好不好还是看使用人员的,接下来看看使用和维护的内容,请容我懒一下
仪器使用及维护:




这个内容太多了,给大家分享下三大品牌的售后服务微信公众号
岛津:中国岛津  微信号Chinashimadzu  进入分析中心——在线学习


安捷伦:安捷伦售后服务  微信号:A8008203278  进入智慧导航——视频集锦




赛默飞:赛默飞服务平台  微信号:Thermofisher_cnsvc
进入培训中心——在线培训


随时随地的学习充电,方便快捷。
最后再次提示一下,很多人经常问厂家什么时间什么地点有培训课程,课程都讲啥内容?官微查一查你就知道了,能动手的尽量别叨叨
既然说一网打尽就不能落下色谱柱了,最后看下常见的色谱柱填料的应用。
色谱柱常见固定相及其用途:

硅胶:非极性和中极性的有机化合物
C1;在所有烷基键合相中保留最低,一般用于中等极性和多官能团化合物。
C4:适合分析肽和蛋白
C8:适合较小的肽和蛋白、药物、类固醇、环境样品
C18:广泛用于药物、类固醇、脂肪酸、临苯二甲酸盐、环境样品
氰基:对极性化合物具有独特的选择性,比碱性硅胶更适合用于正相梯度分离。用于RP时适合多种药物或组分极性相差较大的混合物的分析。
氨基:HILIC机理:碳水化合物分析和其他极性化合物分析
      弱阴离子交换:适合分析阴离子和有机酸
      正相:提供与硅胶不同的选择性,适用于芳香族化合物分析
苯基:芳香族化合物和中极性化合物分析
PFP五氟苯基:卤代或极性化合物以及异构体
Diol 二醇基:RP:肽和蛋白  NP:与硅胶具有相似选择性但极性较低。
SCX强阳离子交换:分析有机碱
SAX强阴离子交换:有机酸、核苷酸、核苷
AX阴离子交换:有机酸、核苷酸、寡聚核苷酸
PGC石墨化碳:强极性化合物、结构相似的化合物如异构体非对映异构体
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一片枫叶
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菩提的作品超凡脱俗别具一格,欣赏此作津津有味耳目一新,不愧是“长胡子的菩提”。
夏天的雪
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长胡子的菩提
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原文由 一片枫叶(v2960432) 发表:
菩提的作品超凡脱俗别具一格,欣赏此作津津有味耳目一新,不愧是“长胡子的菩提”。
不敢当不敢的那个,
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原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
内容很丰富,学习了不少知识
不当之处还请多多指教
feigekai
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内容简单易学,授人以渔,值得学习。前阵子学习岛津的资料都是从你推荐的网站上学习的,谢谢了啊
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原文由 feigekai(feigekai) 发表:
内容简单易学,授人以渔,值得学习。前阵子学习岛津的资料都是从你推荐的网站上学习的,谢谢了啊
哈哈,做好事不留名
夏天的雪
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原文由 长胡子的菩提(v3109824) 发表:
不当之处还请多多指教
看到实验室这么多仪器,加上菩提老师讲解的这么全面,以后要请教的应该是我们
长胡子的菩提
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原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
看到实验室这么多仪器,加上菩提老师讲解的这么全面,以后要请教的应该是我们
俺不是老师,俺还很年轻
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原文由 长胡子的菩提(v3109824) 发表:
俺不是老师,俺还很年轻
三人行必有我师,年轻说明前途无量,大有作为啊
zhj1230
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