主题:【第九届原创】HPLC-RID测定乳糖含量及有关物质

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HPLC-RID法测定乳糖含量和有关物质

      前言: 乳糖是我们制药领域,最常用的辅料之一,我们药用乳糖对其含量和杂质的限量有极其严格的要求。以下就是我们使用《中国药典》2015年版四部标准方法,对购入的一批药用乳糖的含量和有关物质进行分析的过程 ,与大家一起分享,希望各位老师多多指导。

一、【含量测定】
仪器型号电子分析天平:赛多利斯  BT125D型十万分之一电子分析天平      液相色谱仪:Agilent  1260 四元梯度液相色谱仪
色谱条件:色谱柱:氨基柱(上海月旭 拓扑 250*4.6)                检测器:示差折光检测器    检测器温度:40℃
流速:1.0ml/min    柱温:    45 ℃      流动相: 乙腈-水(70 :30 )    进样量: 10μl 
对照品乳糖、蔗糖对照品使用来源:  中国食品药品检定研究院 
系统适用性试验: 精密称取乳糖对照品10.15mg、蔗糖对照品10.21mg,置10ml容量瓶内,用水稀释至刻度摇匀。乳糖峰与蔗糖峰的分离度应大于1.5,理论塔板数以乳糖峰计不得低于5000。
对照品溶液的制备:  精密称取乳糖对照品两份分别为10.10、10.08mg置10ml容量瓶内,用水稀释至刻度摇匀,即得。
供试品溶液的制备:取本品适量,精密称定,两份分别为10.05、10.03mg,  置10ml量量瓶内,用水稀释至刻度摇匀,即得。
检测结果:


              系统适应性试验:  乳糖、蔗糖分离度均大于1.5,乳糖理论塔板数大于5000




                                                      乳糖对照品色谱图


                                                            乳糖供试品色谱图

通过外标法计算本批按无水物计算含量为98.9%,在药典规定的98.0%至102.0之间,符合标准规定。


二、【有关物质】
色谱条件同含量测定项下方法测定

供试品溶液的配制:取本品,精密称定  1.0023g,置10ml量瓶中,用适量水使溶解,并稀释至刻度,摇匀,过滤,即得。
对照品溶液的配制:精密量取供试品溶液1ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,过滤,即得。
有关物质供试品色谱图如下:


通过计算个杂质峰面积之和小于对照峰面积的0.5倍,小于0.5%。
      总结:HPLC-RID测定乳糖含量和有关物质,样品处理简单,要注意的是RID平衡很关键,保证检测器外部环境的稳定很受到重要。
RID为通用型检测器,容易受到气体流动和温湿度的影响。另外色谱柱的选择也很重要,一般的柱子乳糖理论踏板数上5000很容易,
上海月旭拓扑氨基柱优越的性能为检测节省很多宝贵的工作时间。
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最后一天冲刺发一篇,请大家多多指点。
lijing320323
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pfizer2001
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你们用百万分之一天平称量的么?对照品10mg左右,用十万分之一天平是不允许的,根据USP最小称样量一般十万分之一天平在16mg左右。
上党之巅
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原文由 pfizer2001(pfizer2001) 发表:
你们用百万分之一天平称量的么?对照品10mg左右,用十万分之一天平是不允许的,根据USP最小称样量一般十万分之一天平在16mg左右。
可以使用增量法称取呀!
西坡先生
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为什么我做的峰面积只有7-8千呢?哪位老师知道
m3283090
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原文由m3283090(m3283090)发表:????
适用性乳糖和蔗糖浓度都是1mg/ml,蔗糖峰面积有8W,乳糖峰面积只有8千左右。