主题:【第十届原创】应用GB5009.86-2016标准检测水果、蔬菜中的维生素C含量

浏览 |回复30 电梯直达
我是风儿
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
维权声明:本文为nphfm2009原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
8月二等奖
                                                      应用GB5009.86-2016标准检测水果、蔬菜中的维生素C含量
检验依据:
GB5009.86-2016    食品安全国家标准 食品中抗坏血酸的测定
1 试验部分
1.1 仪器与试剂
1.1.1仪器
安捷伦1100高效液相色谱仪,配紫外检测器;密理博超纯水机;超声波消洗器;离心机
1.1.2试剂
甲醇(色谱纯)、磷酸二氢钾、十六烷基三甲基溴化铵均为分析级;试验用水为超纯水
L(+) -抗坏血酸标准物质 (BW4032)  D(+)-抗坏血酸标准物质(1ST2311),临用时将其配制成0.5ug/mL、5.0ug/mL、10ug/mL、25ug/mL、50ug/mL混合标准系列浓度。
1.2实验条件
色谱条件:色谱柱:月旭Ultimtae XB-C18, 4.6×250 mm, 5μm;货号:00310-02043,序列号:w13211570,柱温30℃;流量0.7mL/min;进样量10uL;检测波长:245nm。依据GB5009.86-2016 标准中所述的流动相:
甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L,用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98
1.3标样检测的色素的色谱图
按设定好的仪器条件,对标准样品进行了分析测定,其L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸混合标准溶液(25.0ug/mL)分离的色谱图如下:


对比这三张谱图可以发现:L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸从一开始就未实现基线分离,且随着时间的延长,L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸走着走着就快要变成只有一个峰了啊,怎么回事?
尝试着更换流动相试试:
将标准中的流动相:甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L,用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98更换成甲醇∶0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5,以利于保护该色谱柱)=2:98,其余条件不变。
L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸混合标准溶液(25.0ug/mL)分离的色谱图如下:

可以看出随着时间的延长,L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸二者还是可以很好的实现基线分离。

系列工作曲线点的重叠色谱图:从这张图可以看出它们的出峰时间是比较稳定的,且不会向使用GB5009.86-2016所述的流动相那样,L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸二者走着走着峰就重在一起了。因此使用流动相:0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5)来分析维生素C比较理想。
2 原因分析
GB5009.86-2016标准所述的流动相中含有十六烷基三甲基溴化铵,其是一种表面活性剂,只要轻微的晃动就极易产生小汽泡的,所以难免造成L(+) -抗坏血酸、D(+)-抗坏血酸出峰时间的飘移而产生的不稳定性。
3样品测定及加标回收试验:
依GB5009.86-2016取某果汁饮料样品,做两个浓度水平的标准加入回收实验,称取匀浆好后的样品2克,分别加入L(+)-抗坏血酸0.02mL50ug/mL、0.1mL50ug/mL;D(+)-抗坏血酸0.02mL50ug/mL、0.1mL50ug/mL均按本方法做3次平行测定,L(+)-抗坏血酸平均回收率为86.3%,D(+)-抗坏血酸平均回收率为85.4%。结果见表1.

综合上述:要使L(+)-抗坏血酸和D(+)-抗坏血酸得以基线分离,关键是:将标准中的流动相:甲醇∶(6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲基溴化铵用水定容至1L,用磷酸调pH至2.5-2.8)=  2 ∶ 98更换成甲醇∶0.01mol/L磷酸二氢钾(pH=3.5,以利于保护该色谱柱)=2:98,其余条件不变。
该帖子作者被版主 Aspzz10积分, 2经验,加分理由:原创鼓励!
为您推荐
abcdefghijkl123
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵