主题:【原创】大曹色谱液相豆丁帖 之 压力上升那些事

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capcellpak
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大曹色谱液相豆丁帖 之 压力上升那些事


做着做着实验压力飙升?
压力高到仪器报错或者管线崩开?
别慌,本期的主题就是——压力升高~


啊,看着压力一路飙升感觉血压也一路飙升
怎么办!!!
别慌~YoYo神助攻帮您解决压力问题

遇到压力升高问题:
首先,判断原因——排查发生堵塞的位点在哪里:

-排查方法-

将色谱柱从仪器中取下,看压力是否恢复正常
若压力恢复正常——堵塞位点为色谱柱
若压力未恢复正常——堵塞位点为仪器,继续在通液情况下,从后到前(即从检测器出口排废液处->检测器入口端->两通->自动进样器出口端->进样器入口端->泵)将管线逐渐拧下,当去除某一段组件后,压力恢复正常,即证明堵塞位点为该组件。



排查顺序:由后到前

-色谱柱堵塞解决方案-



色谱柱堵塞解决方案十分简单粗暴——冲柱。
对于反相系色谱柱,一般建议高水相小流速冲洗过夜,再使用高有机相冲洗
(如需其他特殊色谱柱冲洗方法,请留言哦~)

-仪器常见堵塞位点及解决办法-



【管线】
▶ PEEK管线:使用PEEK刀切除两端,注意切口要平整,否则容易残留
▶ 金属管线:进行反冲操作
【在线过滤装置】直接更换部件
【检测池,自动进样器】咨询相应仪器工程师

再接下来,检讨堵塞原因,亡羊补牢:

-色谱柱堵塞常见原因-



【样品原因】
复杂基质样品会导致色谱柱堵塞,需要加强前处理手段,进行高速离心、过滤膜或进行SPE纯化等操作
【流动相原因】
含盐流动相出现盐析——必须提前了解所用盐的溶解性,确保在梯度条件有机相最高点不会发生盐析

-仪器堵塞常见原因-



流动相中微生物滋生或其他异物突然进入都会导致堵塞,建议流动相现用现配,并配合在线过滤装置使用。

最终,经过一系列排查和解决操作,压力问题就能顺利解决啦~

撒花~✿✿ヽ(°▽°)ノ✿

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