主题:【原创】大曹色谱液相豆丁帖 之 不出峰怎么办

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capcellpak
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大曹色谱液相豆丁帖 之 不出峰怎么办


峰呢?我的峰去了哪里?
某天开机实验,色谱图一马平川…
峰呢?我的峰呢?要疯了啊啊啊啊…

怎么办!!!
别怕,YoYo又来帮助你了~
遇到不出峰问题:
首先,判断原因——即不出峰发生位点。

-排查方法-

将色谱柱从仪器中取下,接入两通后再次进样
★如果接两通状态下进样依旧不出峰->仪器系统出现问题
★如果接两通状态下出峰->色谱柱洗脱或平衡问题

常见原因及解决方法


-仪器系统方面导致不出峰-

1.检测器部分:
★检测方法不合适:紫外选择波长不合适
质谱荷质比以及参数设立不合适
荧光发射吸收波长不合适
样品浓度过小检测器灵敏度不够

->此时需要对检测方法进行优化调整
★检测器自身出现问题(如灯寿命到了):需要咨询相应仪器工程师进行维修及更换
2.进样器部分:
★进样针进气泡导致样品并未真正进样成功,一般通过洗针即可解决

-色谱柱方面导致不出峰-

【洗脱不足】
现有分析条件无法对目标物质进行良好洗脱,需对分析条件进行调整:
★反相系列色谱柱——提高有机相比例(PS: 注意不要发生盐析哦)
★离子交换系列色谱柱——提高用于离子交换的盐浓度
★HILIC系列色谱柱——适当提高水相比例
【平衡不充分】
若使用离子交换色谱柱,或离子交换模式分析时,初次平衡需要充足的平衡时间,建议使用流动相小流速平衡过夜

HPLC Conditions:
色谱柱: CAPCELL PAK NH2 UG80 S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流动相:磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾2.72g溶于1000 mL水中) / CH3CN = 45 / 55
流 速: 40°C
检 测: PDA 286nm
浓 度: 1 mg/mL
进样量: 20 μL
于是,现在不出峰的问题还是问题吗?
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capcellpak
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不出峰是液相分析中的常见问题之一,YoYo列举了几种情况,如果您有补充,可以留言一起讨论哦~