主题：【第十一届原创】大蒜中农药多残留的检测流程

                                      大蒜中农药多残留的检测流程
检测项目：农药多残留共 288 项（详见附页）；适用基质：大蒜及其加工品；定量下限：见附页 ；加标水平：50.0μg/kg（气质）；10.0μg/kg（气相）；
上机标液浓度：100μg /L（气质）；20.0μg /L（气相）
仪器条件 ：仪器：GC/MSD 7890A/5975C
检测器：MSD  进样量：1 μL  柱流量：1.0 mL/min
色谱柱：DB-5MS  30m*250μm*0.25μm       
进样口温度：260℃ 四极杆温度：150℃  离子源温度：230℃ 后运行300℃（3min）
炉温：60℃（2min）15℃/min 150℃ 5℃/min 170℃ 2℃/min  210℃ 5℃/min  230℃ 10℃/min  300℃（3min）
仪器：Agilent 7890A -FPD 
检测器：FPD        进样量：2 μL  柱流量：2.0 mL/min
色谱柱：HP-5  30 m ×320 μm × 0.25 μm  ；  DB-17    30 m × 320 μm × 0.25 μm
进样口温度：220 ℃  检测器温度：230 ℃
炉温：60 ℃（1min）20℃/min  150 ℃（2min）5℃/min  230 ℃1 5℃/min    280 ℃（3min）
试剂溶液：1、所用提取和洗脱柱子的有机溶剂为分析纯，定容及标液配制溶剂为色谱纯。
2、饱和氯化钠水溶液：称取36g氯化钠溶于100mL水中。
3、丙酮+正己烷（1+1，v+v）取500mL丙酮与500mL正己烷摇匀。
4、丙酮+乙酸乙酯(1+9，v+v) 溶液：取20mL丙酮加180mL乙酸乙酯混匀
检测流程：
方法一：气相色谱-质谱法（282项）
样品提取：
称取8.00 g（精确至0.01 g）匀浆样品至50 mL离心管中，加入3 mL水、16 mL乙腈，用均质机15000 r/min均质30 s，加入3 g氯化钠，继续均质15 s，旋上盖子充分振荡，3800 r/min离心5 min，用移液管移取上清液4.00 mL (相当于2.00 g样品)待净化。
样品净化
4.00 mL上清液过经10 mL乙腈活化的Envi-18柱（2 g /12 mL），再用20 mL乙腈淋洗，自然流速，收集24 mL洗脱液至鸡心瓶中，鸡心瓶中加入约3 mL饱和氯化钠水溶液35℃旋转蒸发至溶液不分层。将饱和氯化钠水溶液转移至50 mL离心管中，鸡心瓶用约1.0mL丙酮涡旋洗涤转移至50 mL离心管中，鸡心瓶再分别用3×5mL饱和氯化钠溶液和4×5mL正己烷洗涤并将洗液转移到离心管中。合并所有溶液于50 mL离心管中旋上盖子充分振荡，3800 r/min离心5 min，将上清液转移至鸡心瓶中。离心管中加入20 mL正己烷再次振荡离心，合并正己烷35℃旋转蒸发至约2mL待过LC-NH2柱。                                               
将LC-NH2柱置于离心管上，在柱上装入2 cm高无水硫酸钠，用5 mL丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶剂淋洗柱子，弃去洗液。将浓缩液过柱，用12 mL丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶液淋洗，自然流速，收集约14 mL洗脱液35℃用氮气吹至近干，用丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶液溶液定容至1 mL上机。
方法二：气相色谱-FPD法（6项）
样品提取
称取2.00 g（精确至0.01 g）匀浆样品至50 mL离心管中，加入乙酸乙酯20 mL，无水Na2SO4 8 g，用均质机15000 r/min均质1 min，10 mL乙酸乙酯清洗均质头，合并溶液，3800 r/min离心5 min，上清液过无水MgSO4+无水 Na2SO4 (约2 g+10g))漏斗滤入鸡心瓶，残渣中再加入乙酸乙酯20 mL，捣碎，涡旋振荡1 min， 3800 r/min离心5 min，合并提取液至鸡心瓶中，35 ℃减压旋转蒸发至干，待净化。
样品净化
在鸡心瓶中加入3 mL丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶剂，超声波清洗10 s，再加入0.5 g PSA粉末，涡旋振荡30 s，静置15 s，倾斜鸡心瓶，用吸管小心吸取上清液至10 mL玻璃管中，再用2 mL丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶剂洗粉末2次，合并溶液，在35 ℃用氮气吹干，待过柱净化。将LC-Si柱置于15 mL玻璃管上，在柱上装入1 cm高无水Na2SO4，用5 mL乙酸乙酯活化，再用3×1 mL乙酸乙酯涡旋洗玻璃管，过柱，液面到达无水Na2SO4顶端后继续用6 mL乙酸乙酯淋洗，弃去淋洗液共约9 mL，再用13 mL丙酮+乙酸乙酯(1+9，v+v)溶剂洗脱，收集洗脱液在35℃用氮气吹至近干，以丙酮+正己烷(1+1，v+v)溶剂定容至1 mL供GC-FPD测试。

【说明】
所用有机溶剂为分析纯没有重新蒸馏，不影响检测结果不用重蒸，定容上机用色谱纯试剂。
方法一中加3mL水可防止提取过程中样品粘结。方法二中加无水硫酸钠是为了除水并起到研磨帮助提取，防止样品粘结的作用。
方法一中加入3mL饱和氯化钠水溶液是为了可以除去乙腈，而又不会蒸干易于保留一些易挥发性化合物。
方法一中加丙酮洗涤后要有约0.8mL丙酮溶液存在，不可使丙酮挥发干。
注意事项：1、加标回收：采用空白样品进行加标。
对方法一：准确吸取1.00mg/L混合标准工作液0.400 mL到8.00g空白样品中，提取步骤同样品一致，对应最终样品加标水平50.0 μg/kg，上机标液100μg/L。
对方法二：准确吸取0.100 mg/L混合标准工作液0.200 mL到2.00g空白样品中，提取步骤同样品一致，对应最终样品加标水平10.0 μg/kg，上机标液20.0μg/L。
同一批样品只做一个加标，若样品量多则做2到3个加标，大概平均15个样品做一个加标。
2、如检出阳性样品，需复测，样品做双平行，加标可加在阳性样品中，加标水平要相当于检出量的1-3倍。如检出量特别大则需稀释上机，即减少称样量降低最终上机液的浓度，并在原始记录上体现，并换算相应含量。
3、检测项目如少的话可以新建一上机条件，减少升温程序的时间，以缩短走样时间增加效率。
4、对方法一，若目标化合物的定量离子在样品中有干扰，而标液中其他化合物不会产生该目标化合物的定性离子碎片，可以把该离子换成定量离子重新校正计算。






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