主题:【第十一届原创】现代分析技术在中药检验中的应用

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摘要:中药同化学药、抗生素药一样,其检验是药检工作中重要的组成部分,在地方药检中发挥着重要的作用。随着科技的进一步发展,越来越多的先进仪器和分析技术应用在中药检验方面。本文通过检索近年来相关的文献,对现代分析技术在中药检验中的应用进行综述,以期为进一步掌握和了解先进分析技术奠定理论基础。
关键词:  中药检验  现代分析技术  显微鉴别    HPLC    质谱联用
中药检验是一项繁琐的工作,涉及到方方面面。随着时代的发展和科技的进步,越来越多的先进分析技术也应用在中药检验方面。从一开始的显微鉴定到现如今的质谱联用技术,越来越多的先进仪器在中药检验中发挥重要的作用,在辨别真伪优劣中大显身手。本文通过查阅近年来的文献,对现代分析技术在中药检验方面的应用进行综述;
1.显微鉴定技术
显微鉴定是中药检验中较为基本的一种检验方法,该方法具有方便、直观等优点。由于中药科目和种类繁多,每种中药都有其自身的显微特征,所以显微鉴定可以区分不同科目的中药。中药显微鉴定是应用显微鉴定的理论和实验技术,利用光学显微镜(或电子显微镜)对中药的组织、粉末进行微观分析的一门科学。随着科技的发展,近年来,出现了荧光显微技术。荧光显微是利用特定波长的光照射被检物体产生荧光进行镜检的显微光学观测技术。荧光显微镜多是在复式显微镜的架构上安装荧光装置集合而成。荧光装置包括荧光光源、激发光光路、激发/发射滤光片组件等器件1。使用荧光显微镜不仅可以观察到药材组织、粉末中各种细胞及其内含物在普通光学显微镜下所呈现的特征,还能观察到由于细胞、内含物化学性质不同而产生的不同颜色或不同强弱的荧光,从而鉴别中药的真伪优劣。此外,X 射线相衬显微技术和计算机图像技术应用于中药显微鉴别当中,开拓了中药显微鉴别的新的领域,同时新技术的应用也大大的提高了显微鉴别的效率。
2.HPLC技术
HPLC即高效液相色谱,其以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内进行分离,进入检测器进行检测,从而实现对样品的快速分析。检测器是高效液相色谱仪的三大关键部件之一。其检测器要求灵敏度高、噪音低即对温度、流量等外界变化不敏感、线性范围宽、重复性好和适用范围广。用于中药检验的高效液相色谱检测器主要有紫外检测器、光电二极管阵列检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、质谱检测器等。从目前中药检验来看,HPLC占有十分重要的地位。无论是中药材及中药饮片,抑或是中成药和提取物等,在检验
内容上基本上都涉及到HPLC。HPLC可谓是中药检验中最为常用的分析手段之一,尤其在测定含量方面,具有方便、迅速、准确等特点。从单一的成分测定到多组分含量测定,再到一测多评法,均能用到HPLC。可以说,中药检验品种中80%以上的含量测定均需用到HPLC。此外,HPLC不仅能对中药品种进行含量测定,结合指纹图谱技术还可用于中药质量的评价。王洪志等采用HPLC法测定清胰片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素及大黄酚的含量时,结果4种有效成分线性关系及回收率均良好,方法可靠、准确,专属性强,重复性好。陈国宁[5]等用HPLC-ELSD法测定了复方桔梗止咳片中桔梗皂苷的含量,采用Varian 380 -LC 型蒸发光散射检测器( 美国瓦里安公司),漂移管温度为 90 ℃,载气1.8Bar,结果表明该方法简便、重复性好,可用于测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷 D 的含量。张伟等采用HPLC测定了土鳖虫中的黄曲霉素 G2、黄曲霉素B2、黄曲霉素G1、黄曲霉素B1,的含量,荧光检测器激发波长λex为365 nm,发射波长λem为450nm,衍生溶液为 0.05%碘溶液,衍生化泵流速为 0.3 ml/min,衍生化温度为 70 ℃,结果表明方法简便、准确、重复性好,可用于测定土鳖虫中黄曲霉素的含量。
3.质谱联用技术
质谱法即用电场和磁场将运动的离子按它们的质荷比分离后进行检测的方法。测出离子准确质量即可确定离子的化合物组成。分析这些离子可获得化合物的分子量、化学结构、裂解规律和由单分子分解形成的某些离子间存在的某种相互关系等信息。目前常用的质谱仪种类有离子肼质谱仪、三重四级杆质谱仪、四级杆-飞行时间质谱仪等。质谱分析通常与高效液相色谱、气相色谱仪等进行串联分析。三重四级杆质谱仪主要偏重于含量测定,而离子肼质谱仪、四级杆-飞行时间质谱仪主要偏重于定性研究。2015版中国药典中有关川楝子和千里光的含量测定就是利用了液相色谱和质谱串联进行分析其含量的,其主要用的仪器就是三重四级杆质谱仪。此外,三重四级杆质谱仪还用于农药残留方面的检测,我们都知道,许多中药材在种植过程中,可能会受到诸多农药的滥用,造成一些危害元素超标。王建国等运用气相色谱仪-三重四级杆串联质谱法快速检测出某中药85种农药残留,采用的仪器是7890A气相色谱-7000B三重串联四极杆质谱仪,配有电子轰击离子源 (EI源)和7693 型自动进样器(美国安捷伦公司)。该方法具有较高的灵敏性和选择性,在21min内所有组成完成出峰。李洋等用超高效液相色谱-电喷雾串联四级杆飞行时间质谱鉴别出了中药复方制剂八宝丹中的78个化学成分,质谱分析采用四级杆串联高分辨飞行时间质谱,电喷雾离子源正、负离子模式下扫描(范围均为m/z100~1500),其毛细管电压分别为3500V和4000V,二级质谱碰撞能量为10~40eV。该法可对中药复方制剂八宝丹中的化学成分快速鉴别,阐明了八宝丹的化学物质基础,为八宝丹的质量控制及药理机制研究奠定了基础。
4.其他技术
当然,在中药检验中,除了本文中所提到的显微鉴别、HPLC、质谱联用分析方法,此外,还有紫外-可见光分光光度法、气相色谱法、薄层色谱法等均可应用于中药检验分析。在中药材及饮片鉴别方面,PCR、DNA分析遗传标记技术、电脑图像分析技术、细胞生物学技术以及聚类分析技术等新的分析技术得到了较为广泛的研究和应用
5.总结:
  中药的化学成分是极其复杂的,所以中药的检验必然也是繁琐的。中药起到治疗的效果是多种复杂化学成分相互作用的结果。从常规理化鉴别到含量测定,中药检验需要用到诸多分析技术。可以说单靠一种分析方法是远远不够的,中药检验涉及到多种分析方法的组合。未来的检验,必然是多重分析方法相互结合,从而实现更精准的检验,得到更加准确的结果。相信随着科技的发展,随着代谢组学生物基因科学等相关基础科学的不断完善,并且充分运用现代计算机科学技术、仿生技术以及显微技术等为辅助,中药检验分析将向着更为快速、科学、高效的方向发展。
参考文献:
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王丽峰.高效液相色谱法在中草药质量控制中的应用西南大学,2009:5
王洪志,范俊婷,刘勇,等.HPLC法测定清胰片中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的含量.中国实验方剂学杂志,2008,14(9):13-15
陈国宁,邰顺章,黄柳燕.高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D含量.中国药业,2014,23(18):51
张伟,邹耀华,诸葛陇.HPLC法测定土鳖虫黄曲霉素的含量.中国药房,2014,26(30):4269
王建国,魏玉霞,王芳,等.气相色谱-三重四级杆串联质谱法快速检测中草药中85种农药残留.中国卫生卫生检验杂志,2017,27(3):324
李洋,余静,赵亚红,等.中药复方制剂八宝丹中化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS分析.第二军医大学学报,2016,37(12):1548
刘培洪.中药鉴定学新技术新方法研究.亚太传统医药,2015,11(9):42
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