主题:【原创】【大曹色谱 液相豆丁帖】 峰形变差怎么办?Part 1前延

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capcellpak
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在前几期液相豆丁帖的帮助下,压力终于稳了,保留时间也稳了,可峰形这是?

前延!



拖尾!



裂峰!



怎么办怎么办?
别慌~让我们一个一个来~
首先,YoYo来帮您看看峰形前延问题


- 前 延 原 因 -

色谱柱自身出现问题
1) 所有色谱峰均出现类似前延现象

液相方法或化合物结构问题
1) 溶剂效应
2) 样品过载
3) 化合物结构



- 诊 断 方 法 -


1. 根源:色谱柱

→ 现象:所有色谱峰均出现类似前延现象

也就是说,不论是死时间的溶剂峰,还是杂质峰,乃至主峰,均出现类似的前延峰形,如上图,可以看到所有峰的不对称因子均在0.7左右,呈现前延。
看到这种色谱图,基本就可以断定是色谱柱自身出现了问题。

解决方案:
一般情况下,当色谱柱问题导致峰形前延时,多为填料被腐蚀、受损所致。如下图,色谱柱入口端填料由于被腐蚀,已经出现了部分缺失的现象。



对于这种情况,可以尝试对色谱柱进行冲洗再生,但多数情况下效果并不理想,需要更换新的色谱柱。

大曹三耀の常规反相色谱柱冲洗方法
↓↓↓

20%乙腈小流速冲洗过夜→80%乙腈冲洗2h


2.根源:液相方法 or 化合物结构

2.1.溶剂效应
样品溶剂和流动相差异较大时出现。举个栗子,样品以100%乙腈溶解,而流动相为20%乙腈水溶液的情况。洗脱能力的差异或溶解性差异往往会导致峰形不佳的现象。
解决方案:
需要充分考察样品在流动相中的溶解能力,尽可能使用流动相对样品进行溶解。

2.2.样品过载
样品过载也可能导致峰形前延的问题。
解决方案:降低进样量

2.3.化合物自身结构

化合物结构和固定相之间力的作用也可能导致前延峰出现。

解决方案:
→改变流动相pH
→提高缓冲盐浓度
→调整柱温

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2019/2/26 17:02:32 Last edit by capcellpak 举报
PAEs
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