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液相色谱（LC）

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主题：【求助】哪些情况下，不可以直接进样C18柱。

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发表于：2019/04/10 16:50:05 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

液相最常用的是反相柱，ODS硅胶键合柱也就是平时的C18柱，属于非极性柱，用极性溶剂作为流动相，如甲醇/水,乙腈/水等。
主要分离的物质：生物大分子，卤化物，肽及蛋白质，小分子的核酸，核苷酸，多环芳烃等（此句来源于书本资料，不确定是否完全正确，望补充更改。）
平时我用的最多的就是0.1%磷酸水和乙腈流动相，由于我的柱子可能进样了比较强残留的物质无法冲出，目前柱子杂峰严重，那么哪些物质不能进反相柱呢？
我这边了解到一些可能性的情况，当然非绝对情况，仅限参考和交流，欢迎补充……
1、活泼性强的，之前我们就因为进样了甲基草酰氯，导致柱子污染，当时老师傅说的可能性是活泼性的物质会在柱内反应，还可能与柱子中的键相结合，导致损坏柱子。
2、强酸强碱，这个基本都知道，最好调解至与流动相相近的PH。
3、我刚刚翻论坛的时候又看到一个，说金属离子也不可以进柱子，那么待金属离子的，例如银离子，都不可以进柱子吗？如果进柱子需要怎么样的处理呢？
4、一些需要衍生化的物质……这个我不太清楚，哪些集团或者说哪些情况下需要衍生化才可以进柱子而不能直接进柱子呢？
5、反应正在进行，且未反应完全的化合物，这个我听到的说法是，反应未完全的需要进行淬灭后才可进柱子，以免在柱内反应。
以上是我目前了解到的，还有其他需要注意的情况吗，或者大家遇到的，望提供出来学习一下

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2019/4/10 16:54:29 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

刚刚又查了一下柱前衍生的情况：了解到的如下
1、被测组分无紫外吸收需要通过衍生化反应，转化为衍生化产物，然后再经过色谱柱进行分离，使原来不能直接被检测的组分转化为能被所用检测器检测的物质;
2、使被测组分与衍生化试剂有选择地参加反应，而与样品中的其他组分分离
3、改变被测组分在色谱柱的出峰次序，使之更有利于分离。
柱前衍生的优点是可以不必严格限制衍生化反应条件，可以允许较长的反应时间及使用各种形式的反应器。
其缺点是当一个复杂组分样品经过衍生化反应后，有可能产生多种衍生化产物，给色谱分离带来困难。

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