主题:【求助】原梯度分离方法无法分开5种物质,怎样修改梯度分离方法

浏览 |回复2 电梯直达
Insm_67cc8ef5
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照搬了文献上梯度分离方法做5种标准样品,结果是完全不能分开出了一个长达7分钟的大峰。用该梯度方法做单个标样,标样都在8.9分钟左右出峰,出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离,可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀?
原方法  流速0.2ml/min  柱温40度
  时间        流动相甲醇(含0.2%甲酸)的比例      流动相水(含0.2%甲酸)的比例
0.01                            25
5                                40
20                              80
22                              80
22.01                            25
30                                25

文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS  (2mm*250mm  i.d.5微米) ,
我实验室只有C18反相柱子(4.6mmi.d.,150mm色谱柱长度,5UM色谱填料粒径)我照搬文献上原方法,结果分离效果非常不理想,如何改进原方法
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hujiangtao
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welewolf
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