主题:【求助】匪夷所思的waters 2695系统压力,逐针增加

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shadow55
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大家好,
如题,觉得这个案例有点意思,请高手们提供下解决思路。
1、问题描述:
仪器:waters 2695
色谱条件
  • 流动相A:25mM磷酸二氢钾溶液(pH2.5)-甲醇(97:3)
  • 流动相B:甲醇-乙腈(70:30)
  • 洗脱模式:梯度,B相最大比例为50%(4-10min,B%:0-30;10-25min,B%: 30;25-50min,B%:50)。

运行序列后,如下图,进了4针样品,初始压力基本差不多,随着梯度变化,系统压力一针比一针高(面板上的system压力超过sample压力几百bar),但回到初始比例后,压力差距减小。


2、排查过程
2.1 清洗在线过滤器

断开在线过滤器的出口管线,用流动相A进行wet prime(5ml/min),压力超过700psi。
用水超声后接回,压力为300~400psi,重新运行序列,问题依旧,判断可能为盐析出或在线过滤器有问题。
2.2 更换在线过滤器

更换了新的在线过滤器及入口管线,连续进样3针,如下图(绿蓝黑分别是第1针2针3针),系统压力仍然逐针增加,第3针超过系统压力后停止序列。
更换在线过滤器后,连续进样3针。
断开在线过滤器的出口管线,用流动相A进行wet prime(5ml/min),压力超过900psi。
3、结果判断
从目前的排查结果看,猜测是梯度变化盐析出,导致在线过滤器堵塞系统压力增加。
但疑问如下:
  • 一方面从色谱条件上来看,应该不至于啊;
  • 另一方面,如果堵了的话,回到初始比例后,怎么压力又正常了;
  • 该色谱方法在waters2695上已经做过2个月,在其他品牌安捷伦及U3000上运行超过2年一直没出现问题。

请教大家,问题会出现在哪里呢?
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sdlzkw007
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是否更换过流动相品牌,抽滤的膜以及使用了错误类型的膜。
hujiangtao
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fubo1980
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shadow55
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原文由 sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:是否更换过流动相品牌,抽滤的膜以及使用了错误类型的膜。
今天做了没过滤的对比,并且把磷酸盐换成了水,结果竟然也堵。
shadow55
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原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:感觉还是哪里堵了
再继续排查下
shadow55
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原文由 fubo1980(fubo1980) 发表:会不会四元比例阀有堵得地方
直接混合流动相A和B的时候柱压没发现升高,流动相B的比例为40%,可能时间不够长,还得再试下。
气相一只虎
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p3113799
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建议你用单通道走一下,看结果怎么样,如果单通道也是这样那就是某个地方脏或者堵了
p3113799
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慢慢往上个人感觉堵的可能性会比较大一点
火悦
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把仪器整体用60度热水,异丙醇,甲醇冲洗一遍,再做,还有接没接保护住,接的话,换一个。