主题:【求助】液相测6种有机酸,样品峰分离情况不好,如何优化条件?

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猫猫Josie
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目标待测物为:柠檬酸、酒石酸、葡萄糖、苹果酸、果糖、琥珀酸、乳酸、乙酸(该顺序也为出峰顺序)
检测方法为:样品预处理 取 1.5 mL 泡菜水,在 10000 rpm 转速下离心 15min 去除泡菜水中的悬浮 颗粒,用注射器吸取上清液 1 mL 通过 0.22 μm 微孔滤膜,然后将滤液转入 HPLC 的进样瓶中,并放入自动进样盘进行有机酸的 HPLC 分析。 (2)色谱条件 色谱柱 Agilent ZORBAX-SB C18(4.6 mm×250 mm 5 μm),检测器为RID 和UV联用,流动相为 95% 的磷酸缓冲液(0.01 mol/L)和 5%的甲醇,流速为 1 mL/min,检测波长 UV 210 nm,柱温为室温。
标曲图如下:图中2.5-8.0之间六个峰为目标物,其中前两个峰没分开

样品图如下:

求问这种情况,该如何优化?柱子?流动相?
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hujiangtao
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Insm_ade287ba
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qingqingcao
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实际上再可以接上一根短一点的柱子。现在水相比例很高了,也容易伤C18柱子。所以,调整流动相是不合适的。只能再接上一根短柱,将有机相提高一点,比如10-15%。这样就能够分离得很好了,分析时间也不至于太长。

实际上这种含有羧基的用离子色谱更加好。
装深沉
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