主题:【已应助】关于高效液相色谱几个问题

浏览 |回复1 电梯直达
xleif
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
1. 我们分离分析物质时,首选柱肯定是C18柱,我在网上看到这么一个说法,说如果一个物质在水中和正辛醇中分配系数差异较大就可以考虑使用ODS柱,那么这个差异要大到什么程度就可以认为足够了呢?举个例子,如果我的这个待测物在水中的溶解度可以达到20mg/ml,在正辛醇中仅有0.1mg/ml,是否就可以考虑使用C18柱呢?
2.流动相中盐的加入可以改善峰形,但是盐的加入对柱子肯定是有损害的,那么多大浓度我们认为就算高浓度盐呢?20mM?25mM?
3.查阅文献时,我们看到分析某些物质时有的加有buffer的水相经常需要调pH,这个pH的选择有什么依据么?
4.水相中如果含有0.1%的TFA,因为TFA也是有机物,可以直接用ACN洗脱么,还是必须要先10%有机相冲,再用纯有机相保存?
5.我看到有些人待分析物结构含有7个羟基,个人觉得已经算是非常高极性的物质,可是还是用C18柱分析,我手头有个核苷类似物,只含有两个羟基,老师还是建议我直接略过C18柱,换用CN柱等来分析,想问下C18柱分析极性化合物有什么具体的经验么
为您推荐
xleif
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
就说说我知道的一些问题吧~~
3:流动相的pH根据两个点来确定。一是待分析化合物的pKa值,可以上下2个单位浮动;二是缓冲盐本身的pKa值,可以上下1个单位浮动。
4:看你水相中还有别的什么东西吧,如果还有缓冲盐的话就必须用10%有机相先冲一下了;如果流动相只是水和乙腈/甲醇的混合物,那么可以直接上甲醇冲洗保存。