主题:【第十三届原创】低溶度溶液如何稀释最准确?

浏览 |回复3 电梯直达
歪果仁zZ
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
维权声明:本文为v3255306原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。

低溶度溶液如何稀释最准确?



在仪器社区,不管是色谱版面、气相版面、液质版面等等,经常有版友询问如何配制低浓度溶液,如何配制的最准确,现在的仪器灵敏度高了,大家对浓度的准确度要求也越来越高,今天就为大家分享如何快速准确的计算配制低浓度溶液的方法,基本思路是什么。

我们针对这个版友的问题:“标准品是1mg/ml的溶液,需要配置0.4ug/ml的标准品溶液,没有10ul的移液枪,怎么配置?是逐级稀释多次还是尽量少次数?求详细点,谢谢了。”

我们在配制低浓度溶液的思路,一定是稀释次数尽量少,因为操作越繁琐,我们可能出现的误差就越大,回头再追究原因时越复杂;第二是考虑好配制的溶液大约需要多少体积,不能多配制也不要少配制,例如一般液质联用实验的标准溶液需要的量很少,几百微升完全够用,装在2 mL的EP管内方便储存,没有必要稀释时配制2 mL以上的体积,那样费时费力;第三考虑好我们现有的移液枪,哪个最近经过校准,哪个是移液正常的移液枪,我们再根据现有的移液器去完成任务。

回到版友的提问,标准品是1 mg/ml的溶液,需要配置0.4 ug/ml的标准品溶液,没有10 ul的移液枪,怎么配置?我们经常使用的操作是取10 ul的1 mg/ml标准溶液,添加990 ul稀释液,这样的稀释倍数是100倍,即1 mg/ml稀释成了10 ug/ml;取100 ul的1 mg/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即1 mg/ml稀释成了100 ug/ml;取40 ul的10 ug/ml标准溶液,添加960 ul稀释液,即1 mg/ml稀释成了400 ng/ml。

因此这个问题我会如下操作:

1.取100 ul的1 mg/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即1 mg/ml稀释成了100 ug/ml;

2.取100 ul的100 ug/ml标准溶液,添加900 ul稀释液,这样的稀释倍数是10倍,即100 ug/ml稀释成了10 ug/ml;

3.取40 ul的10 ug/ml标准溶液,添加960 ul稀释液,即1 mg/ml稀释成了400 ng/ml。

如果有10 uL的移液枪,两步就可以完成标准溶液的配制。此类方法在配制标准曲线浓度时很便捷,大家可以多加练习便可以掌握。

下面分享几位版主的优质回答:

未来工程师:“一次稀释误差产生次数为1,误差值较大,多次稀释产生误差次数多,误差理论值比较大,但是实际会有正负误差,可能存在正负相消的情况。10倍以内一次稀释,10以外多次比较好。”

Hujiangtao:“需要多次稀释,10ul的枪取样太少了误差太大,一般我们配置标准品最少吸取25ul以上,楼主的浓度可以先吸取100ul定容到25ml,得到4ug/ml中间液,然后吸取4ug/ml 100ul加900ul流动相就得到0.4ug/ml的了。”

砂锅粥:“相当于稀释2500倍(1mg/mL→0.4μg/mL),这个倍数很难一次稀释。可以进行2步稀释,比如第一次稀释25倍,第二次稀释100倍。

举个栗子:移取4mL标液,定容到100mL,此步稀释25倍,此时浓度是0.04mg/mL(40μg/mL),接着再移取稀释后的标液1mL,定容到100mL,此步稀释100倍,此时的浓度就是0.4μg/mL。”

最后感谢仪器信息网提供这个给大家互相交流学习的平台!





为您推荐
wazcq
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
一些指导书 一次性直接稀释1000倍以上的都有
李贝
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
一般稀释到一个中间浓度,再稀释吧?也就是逐级稀释。
另外想问LZ,你的稀释方法,不定容吗?不定容的稀释,采取体积相加的办法,误差大不大?
歪果仁zZ
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 李贝(sunny100) 发表:一般稀释到一个中间浓度,再稀释吧?也就是逐级稀释。另外想问LZ,你的稀释方法,不定容吗?不定容的稀释,采取体积相加的办法,误差大不大?
误差还好,用的是艾本德的自动移液器